موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 1:30 دقيقة • March 4th, 2025
الحصول على أنسجة الحبل الشوكي الثابتة كيميائيا من الفئران المستحثة بإزالة الميالين المناعي الذاتي في نقاط زمنية محددة أثناء تطور المرض.
يحفز المرض الخلايا المناعية ذاتية التفاعل لمهاجمة بروتينات المايلين ، مما يؤدي إلى تدهور غمد المايلين المحيط بالمحاور العصبية.
يتم تجنيد الخلايا السليفة قليلة التغصن في الموقع المصاب ، وتنضج إلى خلايا الدبقية قليلة التغصن ، وإصلاح غمد المايلين.
اشطف المنديل بمحلول عازل لإزالة المثبت الزائد ، ثم عالجها بالأوزميوم ، الذي يرتبط بشحوم المايلين ويعزز التباين للتصوير.
ضع بقع المعادن الثقيلة التي ترتبط بالجزيئات الكبيرة وتعزز التباين.
تجفيف الأنسجة باستخدام زيادة تركيزات الكحول. خذ الأنسجة المضمنة في الراتنج واحصل على أقسام رقيقة للغاية.
باستخدام المجهر الإلكتروني ، قم بقياس سمك غمد المايلين لتصنيف المحاور على أنها مزيلة للميالين بغمد منتفخ وأكثر سمكا ، أو مزيل الميالين بدون غمد ، أو إعادة الميالين بغمد رفيع.
تحديد الضرر المحوري الذي يتميز بانخفاض التباعد بين الخيوط العصبية وتورم الميتوكوندريا أو التنكس الكامل.
تحليل تطور الضرر المحوري وإصلاحه بمرور الوقت لتقييم تطور المرض.