توصيل فيروسي مستهدف إلى الخلايا العصبية القشرية النخاعية في فأر حديثي الولادة لدراسة إصابة الحبل الشوكي

ابدأ بفأر حديث الولادة مخدر مع حبل شوكي عنقي مكشوف جراحيا.

تم حقن هذا الجرذ بفيروس متقدمة يشفر مستقبلا مصمما وبروتين فلوري يستهدف الفيروس الخلايا العصبية في القناة القشرية الشوكية (CST) في القشرة الحركية الجسدية للدماغ.

تحديد خط الوسط للحبل الشوكي باستخدام الشريان الشوكي.

ضع إبرة زجاجية تحتوي على فيروس رجعي ، يشفر إنزيم إعادة الإركاب ، خلف الصفيحة الشوكية المستهدفة حيث توجد أطراف محور CST.

اخفض الإبرة في الحبل الشوكي وحقن الفيروس.

اسمح للفيروس بالانتشار ، ثم اسحب الإبرة ببطء وخياطة الشق.

يدخل الفيروس إلى محطة المحور العصبي CST وينتقل إلى الوراء إلى جسم الخلية ، حيث يعبر عن إنزيم إعادة التمركب.

ينشط هذا الإنزيم الجينات المعدلة وراثيا التي يوفرها الفيروس الأمامي ، مما يسمح بالتعبير عن المستقبل المصمم والبروتين الفلوري فقط في الخلايا العصبية المصابة بشكل مزدوج. تسمح هذه الطريقة بالتحليل المستهدف للخلايا العصبية CST في إصابة الحبل الشوكي.

للحقن المباشر في الحبل الشوكي، استخدم طرف إبرة الحقن الزجاجية لتقريب خط الوسط للحبل الشوكي عن طريق تحديد الشريان الشوكي.

بعد ذلك ، ضع الإبرة خلف الصفيحة C5 عند خط الوسط التقريبي واستخدمها كنقطة مرجعية. بعد ذلك ، باستخدام المناور الصغير ، حرك الإبرة بشكل جانبي إلى اليمين بمقدار 0.3 ملم وقم بخفض الإبرة حتى تلامس سطح الحبل الشوكي.

من هذا العمق ، اغمر الإبرة 0.6 مل