الحقن التجسيمي للفيروسات من أجل تعديل جيني مستقر في نموذج الفأر

ابدأ بفأرة مخدرة بجمجمة مكشوفة في إطار تجسيم.

اخفض حامل المحقنة حتى يتماشى طرف الإبرة مع البريجما ، وهي نقطة مرجعية للجمجمة.

باستخدام الإحداثيات التجسيمية المحددة مسبقا ، حدد موقع المنطقة البطينية تحت البطينية أو

V-SVZ ، وهي مكانة عصبية تحتوي بشكل أساسي على الخلايا الجذعية العصبية أو الخلايا الجذعية العصبية ، وقم بتمييز هذه المنطقة.

قم بإزالة المحقنة وحفر حفرة صغيرة بعناية ، وتجنب تلف الدماغ.

املأ حقنة معقمة بالفيروسات التي تحمل الجينات المعدلة ووضع الإبرة على سطح الدماغ.

أعد وضع المحقنة وخفضها حتى يلامس الطرف الطبقة الداخلية لسطح الدماغ.

اخترق الدماغ للوصول إلى V-SVZ ، وحقن الفيروس ببطء ، واستمر لفترة وجيزة ، ثم اسحب المحقنة.

في V-SVZ ، يدخل الفيروس إلى الخلايا العصبية الوطنية عن طريق اندماج الغشاء. ينسخ الحمض النووي الريبي العكسي إلى الحمض النووي.

ثم يندمج هذا الحمض النووي في جينوم NSC ، مما يتيح التعديل الجيني المستقر ل NSCs.

بعد التخدير ، يحلق فأر عمره ستة إلى ثمانية أسابيع المنطقة الواقعة بين أذنيه. بعد ذلك ، قم بتطهير الجلد باستخدام اليودوفور مثل اليود بوفيدون أو 70٪ الإيثانول. ثم ضع في وضع الانبطاح على إطار تجسيم.

قم بإصلاح رأسه بعناية باستخدام قضبان الأذن ودعم الحنك للجهاز. احتفظ بالماوس على وسادة تسخين مثبتة على درجة حرارة 37 درجة مئوية وقم بتطبيق مواد تشحيم العين على عينيه.

بعد ذلك ،