موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 2:30 دقيقة • August 29th, 2025
ابدأ بفأر حديث الولادة مخدر يوضع على وسادة تدفئة بعصب وركي مكشوف.
ارفع الموقع البعيد للعصب وحقن محلول الحمض النووي البلازميد الممزوج بصبغة. تساعد الصبغة على تتبع توصيل البلازميد.
ضع قطبا كهربائيا من نوع الملقط حول العصب ، مع الحفاظ على فجوة صغيرة بين أذرع القطب.
أدخل المحلول الملحي في هذه الفجوة للتوصيل الحالي.
ضع نبضة كهربائية تحيط بالألياف العصبية تخلق مسام غشائية عابرة في خلايا شوان. ثم اقلب مواضع القطب الكهربائي وقم بتطبيق نبضة كهربائية ثانية. هذا يعزز دخول الحمض النووي البلازميد عبر المسام.
بعد التثقيب الكهربائي ، يعيد غشاء الخلية إغلاق البلازميد ويحبسه.
نظف الموقع وأغلق شق الجلد وقم بتطهيره واسمح للفئران بالتعافي.
في وقت لاحق ، ينتقل الحمض النووي البلازميد إلى النواة ويتكامل في الحمض النووي لخلية شوان ، مما يتيح نقل الجينات بنجاح.
اسحب الجانب البعيد من العصب برفق باستخدام إبرة لرفع العصب المكشوف. أدخل الماصة الزجاجية الدقيقة في الموقع البعيد على العصب، وحقن محلول الحمض النووي عن طريق الضغط الإيجابي الطفيف حتى يظهر العصب باللون الأخضر. بعد ذلك ، ضع قطبا كهربائيا بلاتينا من نوع الملقط على بعد حوالي ملليمتر إلى ملليمترين من العصب.
املأ الفجوة بين القطب الكهربائي والعصب بمحلول كلوريد الصوديوم بنسبة 0.9٪. ضع نبضات كهربائية على موقع الحقن باستخدام جهاز الثقب الكهربائي. بعد ضبط النبض الأول ،
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية