نقل الجينات بوساطة الفيروس إلى نواة القوقعة الظهرية للفأر للتحفيز السمعي الناجم عن الضوء

ابدأ بفأر مخدر مع مكشوفة جمجمته.

تتميز الجمجمة ببضع قحف فوق العظم بين الجدارية ، على يسار خط الوسط ، وذيلية لخياطة lambdoid ، مع إزالة الجافية لفضح المخيخ.

استنشق المخيخ الأيسر الجانبي للكشف عن نواة القوقعة الظهرية الأساسية أو DCN ، وهي بنية جذع الدماغ تحتوي على خلايا عصبية تعالج الإشارات السمعية.

أضف المحلول الملحي لمنع تخثر الدم وتنظيف السوائل المتبقية.

ضع حقنة مجهرية تحتوي على ناقل فيروسي يشفر opsin ، وهي قناة أيونية حساسة للضوء.

اخفض الإبرة في DCN.

حقن المعلق الفيروسي بمعدل متحكم فيه ، ثم اسحب الإبرة.

خياطة الشق والسماح للفأر بالتعافي.

يرتبط الفيروس المحقون بالمستقبلات العصبية DCN ويخضع للالتقام الخلوي.

داخل النواة العصبية ، يؤدي الحمض النووي الفيروسي إلى التعبير الجيني ، مما يؤدي إلى إنتاج opsin.

النموذج جاهز للتحفيز الناجم عن الضوء للمسار السمعي.

استخدم خمسة أنبوب شفط فرنسي لشفط الجزء الجانبي الأكبر من المخيخ الأيسر ، فوق DCN. لتجميع الشفط ، اضبط المستوى البؤري للمجهر على العمق المتوقع لنواة القوقعة الصناعية لتحسين التصور وضمان صورة حادة. قم بإزالة ما يقرب من ربع إلى ثلث المخيخ الأيسر.

المعلم الرئيسي المجاور ل DCN هو أمبولة القناة نصف الدائرية العليا. بعد الشفط ، سيظهر المزيد من النزيف وتراكم السائل النخاعي وإزاحة المخيخ على DCN. غرس المحلول الملحي بسرعة في حج القحف لمنع تخثر الدم. استخد