في الرحم نقل الفيروس في الفأر

خذ خليطا من الفيروس يحتوي على الجين المطلوب للتحويل وصبغة تتبع في مخزن مؤقت.

شفط خليط صبغة الفيروس في شعرية رفيعة الرؤوس.

خذ فأرة حامل مخدرة مع حلق منطقة البطن.

تطهير الجلد بالإيثانول ، متبوعا بمحلول البيتادين.

قم بعمل شق خط الوسط لفضح تجويف البطن ، ووضع طبقة البارافين فوقه.

كشف قرون الرحم وصب العازلة عليها لمنع الجفاف.

لاحظ ترتيب الأجنة وموضعها. اضبط موضع الجنين داخل كيس الرحم للوصول إلى مواقع الحقن.

حقن خليط صبغة الفيروس في الحبل الشوكي وبطنين الدماغ.

تأكد من الحقن الدقيق من خلال تصور توزيع الصبغة.

ضع قرون الرحم مرة أخرى في تجويف البطن واسكب بعض العازلة.

خياطة تجويف البطن ، متبوعا بالجلد.

يدخل الفيروس المحقون إلى الخلية المضيفة ، ويطلق الجين المستهدف ويسمح بالتعبير عنه.

ابدأ بتحميل طرف شعري مخصص يحتوي على أربعة أضعاف 10 إلى 11 جزيئا فيروسيا من طلاء الفيروس من النوع 1 المرتبط بالغدة للهدف المطلوب ، ويسمى بصبغة Fast Green على أنبوب شفاطة. أضف 15 ميكرولترا من جزيئات الفيروس المرتبطة بالغدة المسمى إلى الشعيرات

الدموية.

بعد ذلك ، تأكد من عدم الاستجابة لقرصة إصبع القدم في فأر حامل في يوم مخدر للجنين 14.5 فأر ، وقم بتطهير الجلد. استخدم ملقط القزحية المسنن المنحني ومقص كربيد التنجستن المستقيم لعمل شق في الجلد على طول الخط المتوسط. باستخدام ملاقط دومون المستقيمة للإمساك بالجدار البريتوني ، استمر على طول الخط ألبا بمقص Vannas مستقيم وضع قطعة من فيلم البارافين المحشو فوق فتحة البطن واستخدم جهازا يشبه الملعقة لفضح قرون الرحم دون الإضرار بالأجنة داخل القرون.

بعد وضع بضع قطرات من 37 درجة مئوية PBS على قرون الرحم ، افحص الأجنة بحثا عن تلف أو تشوهات داخل كيس الرحم. اقلب الأجنة بعناية داخل أكياسها حتى يتم تحقيق الموضع المطلوب لكل حقنة. عندما تكون الأجنة في مكانها ، قم بحقن ميكرولتر إلى ميكرولتر من محلول جزيئات الفيروس المسمى Fast Green في كل جنين.

بعد حقن جميع الأجنة ، ضع قرون الرحم مرة أخرى في تجويف البطن ، وأضف بضع قطرات من 37 درجة مئوية PBS في البطن. ثم استخدم خيوط البولي أميد بحجم 6-0 لإغلاق الجدار البريتوني وخيوط البولي أميد بحجم 3-0 وملقط مرقئ البعوض من Halsted لإغلاق الجلد.