نموذج فأر لدراسة الانتقال الممرضي لمجمع المكورات الرئوية بعد العدوى الفيروسية المشتركة

ابدأ بالمكورات الرئوية الناتجة عن الأغشية الحيوية، وهي مستعمر أنفي بلعومي بدون أعراض، معلق في حاجز

يعطى التعليق عن طريق الأنف لفأر غير مخدر، مما يسمح بالاستنشاق إلى الجهاز التنفسي العلوي.

في الظهارة الأنفية البلعومية، تتكون البكتيريا طبقة حيوية تسهل الاستعمار وتثبط إنتاج السيتوكين المضادة للفيروسات من خلايا المضيف.

بعد التخدير، قم بمد لسان الفأر للوصول إلى القصبة الهوائية.

إعطاء فيروس الإنفلونزا أ في القصبة الهوائية لإصابة الجهاز التنفسي السفلي.

بعد تعافي الفأر، قم بتلقيح الفيروس فورا عن طريق الأنف لاستهداف الجهاز التنفسي العلوي.

تؤدي العدوى الفيروسية إلى خلل في تنظيم الجهاز المناعي للمضيف وتلف الأنسجة المخاطية، مما يؤدي إلى انتشار البكتيريا في الجهاز التنفسي السفلي.

في بيئة الرئة المتغيرة بالفيروس، تتحول البكتيريا إلى مسببات أمراض غازية، مما يسبب التهابا رئويا وانتشارا جهازيا.

كما أن العدوى تثبط وظيفة العدلات، مما يقلل من تطهير البكتيريا.

يتيح هذا النموذج المشترك للعدوى دراسة التفاعلات بين المضيف والميكروبات.

قم بإذابة الأغشية الحيوية الناتجة على الجليد وادور بقوة 1,700 جرام لمدة خمس دقائق. قم بإزالة السوبرناتينت بعناية وتخلص منها دون أن تتسبب في تشويه الحبيبة. ثم اغسل الحبيبة بإعادة تعليقها في 1 ملليلتر من PBS وقم بتدويرها مرة أخرى. قم بإزالة المادة الفائقة وأعد تعليق الحبيبات في الحجم المطلوب للوصول إلى التركيز المطلوب.

قم بتطعيم فأر C57 الأسود ذكور ستة عن طريق الأنف ب 5 مرات 10 إلى وحدة تكوين المستعمرة السادسة أو CFU عن طريق حقن 5 ميكرولتر من اللقاح المخفف في كل ناريس. بعد التطعيم، أمسك الفأر بإحكام، وثبت الرأس حتى يتم استنشاق الصوت. بمجرد ذوبان الفيروس، قم بتخفيف الفيروس في PBS إلى التركيز المطلوب.

ضع مرطب العيون على عيني الفأر قبل التخدير. قم بإصابة الفأر المخدر فورا ب 50 ميكرولتر من 20 وحدة مكونة لللويحات (PFU) من فيروس الإنفلونزا A أو IV داخل القصبة الهوائية باستخدام ملقط غير حاد لسحب اللسان من الفم ونقل كمية السائل إلى القصبة الهوائية. بعد التعافي، قم بتطعيم 10 ميكرولتر من 200 PFU من اللقاح الداخلي عبر الأنف باستخدام طريقة التلقيح الموضحة سابقا.