احتشاء عضلة القلب الحاد في الفئران

نموذج الفئران من احتشاء عضلة القلب الحاد (AMI) مفيد لدراسة نتيجة لMI على وظيفة القلب الفيزيولوجية المرضية والفسيولوجية.

الهدف العام من هذا الإجراء هو نمذجة احتشاء عضلة القلب الحاد في الفئران لدراسة آليات الإشارات القلبية المرتبطة بالاستجابة الفورية لعضلة القلب لنقص تروية القلب ، تليها إصابة إعادة التروية. تشمل هذه الاستجابات حجم الاحتشاء والمنطقة المعرضة للخطر وموت الخلايا. تتمثل الخطوة الأولى في كشف البطين الأيسر عن طريق عمل شق صغير في المساحة الوربية الرابعة للجانب الأيسر من الصدر ونشر الأضلاع بمجرد عزلها.

ربط الشريان الهابط الأمامي الأيسر أو LAD بشكل عابر لمدة 30 دقيقة بعد الفترة الإقفارية. يتم تحرير ربط LAD مما يسمح بإعادة تروية القلب بعد فترة إعادة التروية لمدة أربع ساعات. يتم ربط LAD مرة أخرى قبل استئصال القلب وفحصه لمعرفة حجم منطقة عضلة القلب الاحتشاء المعرضة للخطر وغير المعرضة للخطر.

في النهاية ، نتائج التقييم النسيجي للاحتشاء. يمكن استخدام عضلة القلب لاستكشاف الاستراتيجيات العلاجية لعلاج قصور القلب. يمكن أن توفر هذه التقنية نظرة ثاقبة لآليات الإشارات المرتبطة بالاستجابات الفورية لنقص التروية ، تليها إصابات بارعة مثل حجم الاحتشاء والمنطقة المعرضة للخطر وموت الخلايا.

يمكن استخدام هذا النموذج لتقييم الاستراتيجيات العلاجية الجديدة لعلاج أمراض القلب الإقفارية. سيظهر الإجراء باحثا مشاركا أول و X ، زميل ما بعد الدكتوراه الأول من مختبر الدكتور برادلي ماكونيل في قسم العلوم الدوائية والصيدلانية بجامعة هيوستن ، وهو عضو مؤسسي في مركز تكساس الطبي. قبل أن يبدأ الإجراء الجراحي ، يجب تطهير سطح التشغيل بنسبة 70٪ من الإيثانول.

تعقيم جميع الأدوات الجراحية بمعقم الخرز الساخن قبل كل عملية جراحية فردية. تشمل الأدوات المطلوبة مقصين جراحيين ، وملقط واحد ، وملقط منحني ، وحاملي إبرة ، وضام صدر. اضبط درجة حرارة نظام البطانية الموضوعية homeo بحيث يحافظ على درجة حرارة جسم عند 37 درجة مئوية زائد أو ناقص درجة مئوية.

حجم الاحتشاء على مدة الانسداد وكذلك درجة حرارة الجسم. احصل على شاش قطني وأدوات تطبيق متاحة بسهولة لإدارة النزيف. يتم استخدام التي تجتاز الفحص البدني فقط عن طريق الفحص البصري وقياس معدل ضربات القلب ومعدل التنفس ودرجة حرارة الجسم ووزن الجسم في هذه الدراسات.

سجل الوزن وتحديد خصائص السليمة التي ستخضع لعملية جراحية في اليوم السابق للجراحة. تطبيق جرعة من أقنعة البوبرينورفين. يجب ارتداء العباءات والقفازات طوال العملية بأكملها ، ويجب تغيير القفازات بين العمليات الجراحية الفردية.

للبدء تخدير الفئران وإعداد موقع الجراحة عن طريق حلق الفراء جيدا من مناطق الرقبة والصدر. تطهير المناطق المحلوقة بمحلول البيتادين ، متبوعا بنسبة 70٪ إيثانول. كرر هذا الإجراء ثلاث مرات.

ضع على نظام بطانية موضوعي للصيانة المناسبة لدرجة حرارة الجسم. مستلقية على جانبه الأيمن. يجعل شطف حواف أنبوب البولي إيثيلين الإدخال في الحنجرة أسهل.

أدخل الأنبوب الرغامي بمساعدة مجهر ستيريو جراحي. التلاعب باللسان برفق حسب الحاجة وإبقاء القصبة الهوائية في الاعتبار. قم بتوصيل أنبوب القصبة الهوائية بجهاز التنفس الصناعي الذي يدور بمعدل 80 نفسا في الدقيقة وحجم المد والجزر 1.2 مل لكل 100 جرام من وزن الجسم.

بمجرد تحقيق التهوية الميكانيكية ، ضع ستارة معقمة فوق الجرذ مع ترك المنطقة الجراحية فقط مكشوفة. بمجرد إنشاء التنفس الثابت ، افتح الصدر في المساحة الوربية الرابعة اليسرى. قلل من درجة قطع الأنسجة لتقليل خطر النزيف.

ضع ضام الصدر داخل المساحة الوربية الرابعة وانشر الأضلاع لكشف البطين الأيسر أو يجب توخي الحذر حتى لا تتلف الرئة. بعد ذلك ، افتح التامور واتركه في مكانه. إذا أمكن ، حدد الشريان الأمامي الأيسر القريب أو الشريان الهابط LAD باستخدام مجهر ستيريو جراحي.

عابر ، قم بربط أو ربط بعقدة الانزلاق LAD للحث على نقص التروية. الحرص على عدم إخراج القلب من الخارج. يتم تأكيد ربط LAD من خلال ملاحظة ابيضاض أنسجة عضلة القلب البعيدة عن الخياطة ، وكذلك الخلل الوظيفي في الجدار الأمامي خلال فترة الإقفار.

بعد فترة إقفارية مدتها 30 دقيقة ، ابدأ بإعادة تروية القلب عن طريق قطع أو تحرير الرباط حول LAD باستخدام مقص جراحي مجهري. يتم التحقق من إعادة التروية من خلال عودة اللون الأحمر إلى أنسجة عضلة القلب وإظهار بعض الانتعاش لحركة الجدار الأمامي التي لوحظت مباشرة بعد إطلاق ربط LAD. الإجراء متطابق لفئران التحكم الزائفة ، باستثناء أن LAD غير مرتبط بشكل عابر.

قم بإزالة ضام الصدر وارسم الضلوع معا بنمط خياطة متقطع. بمجرد إغلاق الضلوع ، قم بإنشاء ضغط سلبي على الصدر لضمان التنفس السليم عن طريق سحب الهواء من تجويف الصدر. أخيرا ، أغلق الجلد بنمط خياطة مستمر بعد الجراحة ، ضع الجرذ في قفص به وسادة تدفئة ومراقبة درجة حرارة الجسم بالماء بواسطة مقياس حرارة المستقيم ، ومعدل التنفس عن طريق الفحص البصري ، ومعدل ضربات القلب عن طريق الخفقان وعلامات الألم غير الطبيعية حتى يصبح متنقلا.

يجب إعطاء محلول ملحي معقم. إذا لوحظت علامات الجفاف، فقم بتطبيق البوبرينورفين مباشرة بعد الجراحة. بعد فترة إعادة التروية لمدة أربع ساعات ، ضع الجرذ المخدر مرة أخرى في منطقة الجراحة.

تصور البطين الأيسر كما هو موضح سابقا وقم بربط LADA مرة ثانية أو يمكن إعادة ربط العقدة المنزلقة. حقن ملليلتر واحد من 5٪ إيفانز الأزرق والمحلول الملحي في غرفة البطين اليمنى واتركه ينفجر لمدة دقيقتين. بعد هذه الفترة ، قم بحقن مليلتر واحد من محلول كلوريد البوتاسيوم المشبع في غرفة البطين اليمنى لمنع القلب من النبض بسرعة واستئصال القلب وتضمينه في محلول ملحي مخزن مخزن بالفوسفات الزراعي بنسبة 2٪.

بمجرد أن يتجمد الغرو في درجة حرارة الغرفة ، قم بتقطيع القلب إلى أقسام من واحد إلى ملليمترين. قم بتلطيخ عضلة القلب القابلة للحياة باستخدام 2٪ ثلاثية ترين أو كلوريد الأوليوم أو TTC لمدة 20 دقيقة والتقط صورة لكل شريحة مرئية. هذه صورة تمثيلية لقلب الفئران.

بعد أربع ساعات من إعادة التروية ، تمثل المنطقة باللون الأزرق المنطقة غير المسدودة أو غير المعرضة للخطر. تشير المناطق الحمراء إلى المنطقة المعرضة لخطر الاحتشاء وتشير المناطق الصفراء البيضاء إلى عضلة القلب الاحتشاء داخل المنطقة المعرضة للخطر. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية الأداء في احتشاء عضلة القلب الحاد في الفئران والنموذج الحيواني المستخدم لتقليد أمراض القلب الإقفارية البشرية.

يمكن استخدام هذا النموذج لدراسة الاستجابات الفورية لنقص التروية ، تليها إصابة إعادة التروية التي تكون خلال الساعات العديدة الأولى ، مثل حجم الاحتشاء وخطر المنطقة وموت الخلايا. كما تلاحظ في هذا الفيديو ، حظا سعيدا في تجاربك.