دليل ضبط النفس وطرق الإدارة المشتركة في مجمع الفئران والجرذان

الهدف العام من الفيديو التالي هو تعريف المشاهد بمختلف التقنيات المستخدمة في التقييد اليدوي وإعطاء المركبات في الفئران والجرذان. يمكن تقييد الفئران والجرذان باستخدام عدد من تقنيات اليد الواحدة أو اليدين، أو باستخدام المقيدات البلاستيكية. كما يتم عرض تقنيات إعطاء المركبات، مثل الحقن داخل الصفاق، وتحت الجلد، وداخل الأوعية الدموية، وداخل الأدمة. كما يوضح هذا الفيديو طرق الحقن، بالإضافة إلى التغذية القسرية الفموية والإعطاء عن طريق الأنف.

يعد تعلم كيفية التعامل مع الحيوانات بثقة ورفق وأمان جزءاً هاماً من الأبحاث التي تُجرى داخل الجسم الحي (in vivo). يجب دائماً التعامل مع الحيوانات بطريقة تضمن سلامة كل من الحيوان والباحث. وبشكل عام، قد يواجه الأشخاص الجدد في هذه الأساليب بعض الصعوبات، حيث يتطلب الأمر وقتاً للتعود على العمل مع القوارض.

قد تسبب القوارض أيضاً حالة من الرهبة أو الخوف لدى الأشخاص المبتدئين في التعامل معها. ويعد العرض المرئي لطرق إعطاء الجرعات وتقنيات التقييد أمراً أساسياً لضمان نجاح إعطاء المركب، وكذلك لمنع حدوث ضيق أو إصابة للحيوان أو للشخص القائم بالتقييد. يمكن تقييد الفئران يدوياً باستخدام تقنية تعتمد على يد واحدة أو يدين.

تتمثل الخطوة الأولى في كلتا الطريقتين في رفع الفأر برفق من قاعدة الذيل ووضعه على قضبان سقف القفص السلكية، أو أي سطح خشن مماثل. بالنسبة لتقنية اليد الواحدة، يتم ثني قاعدة الذيل بين الإصبعين الثالث والرابع مع سحب الذيل للخلف برفق، مما يدفع الفأر للتمسك بالسطح والسحب إلى الأمام.

بعد ذلك، أمسك الفأر بإحكام من الرقبة باستخدام اليد نفسها التي تمسك بالذيل. أمسك بالقرب من قاعدة الرأس باستخدام السبابة والإبهام، ثم مدّ القبضة على طول الظهر من خلال إشراك الإصبعين الأوسط والبنسر.

تأكد من تطبيق ضغط كافٍ فقط على الجلد حول الرقبة لمنع الفأر من الدوران أو الالتواء، ولكن ليس بدرجة تعيق تنفس الحيوان. وتتشابه التقنية التي تستخدم فيها كلتا اليدين مع هذه الطريقة، باستثناء أنه بينما تسحب إحدى اليدين الذيل بلطف للخلف، تقوم اليد الأخرى بالإمساك بالفأر بسرعة وبحزم من جلد الرقبة (القفا)، بحيث يكون الذيل في يد وجلد الرقبة في اليد الأخرى. ارفع الفأر وثبّت قاعدة الذيل بين راحة اليد والإصبع الثالث أو الرابع لليد التي تمسك بالرقبة.

كما سبق، تأكد من أن القبضة محكمة، ولكنها تسمح للحيوان بالتنفس في الوقت ذاته. عادةً ما يتم إجراء عملية إمساك الجرذ من الرقبة (scruff) بكلتا اليدين. أولاً، أخرج الجرذ من قفصه وضعه على سطح خشن.

بعد ذلك، أمسك الجرذ من الذيل باليد غير المهيمنة واسحبه. اسحبه برفق إلى الخلف، مع تثبيت الذيل بإحكام في يد واحدة، ثم اقترب من منطقة الرقبة (القفا) من الخلف باليد الأخرى. اضغط برفق على ظهر الجرذ أثناء التحرك صعوداً باتجاه لوحي الكتف.

وأخيرًا، الإمساك بمنطقة القفا بين الأصابع وراحة اليد. قد تصدر الجرذان أصواتًا عند تقييدها بهذه الطريقة. عند استخدام قبضة فوق الكتف، أمسك الجرذ من الذيل باليد المهيمنة واسحبه للخلف برفق.

بعد ذلك، ضع اليد غير المهيمنة فوق ظهر الجرذ مع الاقتراب من الخلف. أمسك الجرذ من منطقة الصدر باستخدام إصبع البنصر والخنصر والإبهام، على أن يكون رأس الجرذ بين إصبعي السبابة والوسطى.

هناك طريقة أخرى للتثبيت وهي قبضة ما تحت الكتفين. أمسك الذيل باليد المهيمنة كما رأينا سابقاً وضع اليد غير المهيمنة فوق ظهر الجرذ مع الاقتراب من الخلف. بعد ذلك، أمسك الجرذ من منطقة الصدر مباشرة تحت لوحي الكتف.

يجب دفع ساعدي الجرذ برفق إلى الأعلى باستخدام الإبهام والسبابة. يجب أن يتقاطع الساعدان تحت ذقن الجرذ لمنعه من العض. يمكن إمساك الجرذ بهذه الطريقة بيد واحدة إذا تم تثبيت الجسم مقابل الشخص الذي يقوم بالتعامل معه.

يمكن أيضاً استخدام قطعة بلاستيكية رقيقة ومرنة على شكل مخروط تسمى مخروط إزالة الغطاء (decapping cone) لتقييد الحيوان. ادفع الحيوان للأمام حتى يبرز أنفه من الفتحة الموجودة في نهاية المخروط، ثم إما أن تمسك الكيس مغلقاً حول الذيل أو تستخدم شريطاً مطاطياً أو رابطاً ملتوياً لتثبيت الحيوان في مكانه. وبمجرد التقييد، يمكن إعطاء الحقن عبر المادة البلاستيكية، كما يفيد استخدام حاوية بلاستيكية صلبة عندما تكون هناك حاجة للوصول إلى الذيل.

ضع الجرذ وفقاً لتعليمات الشركة المصنعة للجهاز. وفي هذا النوع من أدوات التثبيت، يتم سحب الجرذ برفق إلى الخلف داخل أداة التثبيت من الذيل. ضع سدادة الإغلاق في مقدمة الجهاز واضبطها للحد من حركات الحيوان.

إذا بدت الحيوانات مضطربة، يمكن استخدام طريقة التقييد بالمنشفة؛ حيث إن الظلام والتقييد اللطيف الذي توفره المنشفة يمكن أن يهدئ الجرذ الثائر. ضع المنشفة بلطف فوق الجرذ، ثم أمسك الجرذ بعناية من حول الجسم. لف المنشفة حول الجرذ، مع الحرص على عدم تغطية أنف الجرذ.

حرك المنشفة بحيث يتم كشف جزء الجسم المخصص للحقن. وقبل تنفيذ أي من تقنيات الإعطاء التالية، من المفيد التدرب على التعامل مع المحقنة. ومن الناحية المثالية، تقوم إحدى اليدين بالتحكم في المحقنة بينما تقوم اليد الأخرى بتثبيت الحيوان، ويُفضل إدخال الإبر في جسم الحيوان بحيث يكون الشطب للأعلى، خاصة في حالة الحقن الوريدي.

تتعرض الإبر ذات القياس الدقيق للتلف بسهولة عند إدخالها في سدادات القوارير. استخدم إبرة ذات قياس أكبر لسحب المواد، ثم استبدلها بإبرة ذات قياس أصغر للحقن. يُستخدم الإعطاء عن طريق الأنف لبعض أنواع العوامل المعدية في أبحاث الحساسية والربو، وفي بعض الدراسات التي تشمل الرئتين.

لا يتطلب الإعطاء عن طريق الأنف التخدير والجراحة كما هو الحال في التثبيت داخل الرغامي. ولغرض الإعطاء عن طريق الأنف، يتم تقييد الحيوان كما هو موضح سابقاً، ثم توضع كمية صغيرة من المادة المراد استنشاقها عند منخري الحيوان باستخدام حقنة أو ماصة. يتم مراقبة المادة حتى تختفي داخل المنخرين، وتكرر العملية حسب الضرورة.

تُعطى المركبات عن طريق الحقن العضلي إذا كانت تتطلب امتصاصاً سريعاً ويمكن إعطاؤها في أحجام صغيرة جداً. قد يتطلب تثبيت الحيوان للحقن العضلي وجود شخصين، حيث يجب أن تكون إحدى الساقين الخلفيتين حرة ومثبتة لإجراء الحقن. أدخل الإبرة بشكل عمودي على الجلد فوق العضلة رباعية الرؤوس أو الكتلة العضلية للفخذ الجانبي للحيوان.

يجب توخي الحذر لتجنب الحقن في الكتلة العضلية الخلفية، حيث من الممكن إلحاق الضرر بالعصب الوركي. ويتم اختيار الإعطاء داخل الصفاق في حال وجود حجم كبير من المركب المراد إعطاؤه، وهو أمر مقبول بالنسبة لمعدل الامتصاص ليكون مقارباً للإعطاء عن طريق الفم.

لإجراء حقن داخل الصفاق، قم بتثبيت الحيوان وتوجيه طرف أنفه نحو الأرض. ولكشف البطن، حدد الخط المتوسط للحيوان وقم بتقسيم البطن ذهنياً إلى أرباع.

اختر موقع حقن في الأرباع السفلية، وتحديداً في الربع السفلي الأيمن للحيوان، واستخدم سرنجة وإبرة ذات حجم مناسب لحقن المادة في الحيوان. يُستخدم الإعطاء تحت الجلد للمادة عندما يكون الامتصاص البطيء هو المطلوب.

تمتلك الفئران والجرذان كميات كبيرة من الجلد الرخو، لذا يمكن حقن أحجام أكبر نسبياً تحت الجلد مقارنة بالبشر. بالنسبة للحقن تحت الجلد، قم بتثبيت الحيوان بشكل غير محكم كما تم توضيحه سابقاً. أمسك الجلد واسحبه بلطف إلى الأعلى.

لإجراء عملية التخييم (making a tent)، استخدم محقنة وإبرة بحجم مناسب، ثم أدخل الإبرة بزاوية تتراوح بين 30 إلى 45 درجة في الجلد المرفوع (المخيّم) وحقن المادة. ويعد ظهور تورم صغير تحت الجلد علامة على نجاح عملية الحقن. وفي حال تطلبت الحالة التعامل مع الحيوانات بشكل روتيني بعد الحقن تحت الجلد، تجنب الإمساك بها من منطقة الرقبة (the scruff).

بدلاً من ذلك، استخدم الجلد الموجود على منطقة الكفل الظهرية. في حال كانت الحيوانات ستتلقى حقناً متعددة تحت الجلد، يجب التناوب بين مواقع الحقن. قد يكون تقييد الحيوانات أثناء الإعطاء داخل الجلد أمراً صعباً ويتطلب استخدام التخدير الكيميائي. وفي حال استخدام مخدّر، تأكد من أنه لا يتعارض مع أي من أهداف البحث.

عند إجراء حقن داخل الجلد، قم أولاً بإزالة الشعر من موقع الحقن بحيث يكون الجلد مرئياً بوضوح في مكان الحقن. أدخل إبرة ذات حجم مناسب في الجلد بزاوية تتراوح بين 15 إلى 30 درجة. لا تدفع الإبرة إلى الداخل بعمق كبير.

إذا تم الإدخال بشكل صحيح، فمن المفترض أن تواجه عملية الحقن مقاومة. ستظهر فقاعة صغيرة، تكون شاحبة اللون مقارنة بالجلد المحيط بها، في حال نجاح عملية الحقن. قم بتطبيق ضغط خفيف لمنع التدفق العكسي للمادة.

يُستخدم الإعطاء داخل الأوعية الدموية لمجموعة واسعة من المركبات، وهو أفضل مسار عندما يمكن صياغة المركب بشكل مناسب ويكون التأثير السريع جداً مطلوباً. لإجراء حقن داخل وعائي في الوريد الذيلِي الجانبي، قم بتثبيت الحيوان في مخروط تثبيت الرأس أو في مثبت قوارض بلاستيكي. وكما تم توضيحه سابقاً، أمسك ذيل الحيوان من الطرف باستخدام اليد غير المهيمنة لفرد الذيل وتدويره. قم بتدويره ربع دورة لجعل الأوردة الذيلية في وضع ظهري.

حدد أحد الوريدين الجانبيين في الذيل للحقن مع تجنب الشريان البطني للذيل. اقترب من الجزء القاصي من الذيل بالإبرة بزاوية تتراوح بين 15 إلى 20 درجة ثم احقن المادة. ستؤدي عملية الحقن الناجحة إلى دخول المادة في الوريد دون مقاومة مع شحوب لون وريد الذيل طوال فترة الحقن.

يؤدي وضع الحقنة في منطقة أكثر بُعداً إلى الحفاظ على جزء غير متضرر من الوريد يمكن استخدامه في حال فشل المحاولة الأولى. يتم إجراء الإعطاء داخل المعدة أو التغذية القسرية الفموية فقط على الحيوانات المستيقظة والمقيدة، حيث أن التخدير أو التهدئة تزيد من خطر الاستنشاق؛ وغالباً ما يتم إعطاء المركبات التي يتم اختبار سلامتها للإعطاء الفموي البشري بهذه الطريقة. ابدأ باختيار إبرة تغذية فموية ذات حجم مناسب.

يتم تحديد الطول عن طريق رفع الحيوان المقيد والقياس بدءًا من زاوية الفم. يجب أن تصل النهاية الكروية لإبرة التغذية إلى آخر ضلع للحيوان، مع تقييد الحيوان بحيث يكون الرأس والجسم في خط عمودي مستقيم.

يؤدي ذلك إلى تقويم المريء، مما يسمح بمرور إبرة التغذية بسهولة أكبر. أدخل الطرف الكروي للإبرة في فم الحيوان فوق اللسان. وبمجرد استقرار الإبرة في مكانها، ارفع الإبرة والمحقنة مع الضغط بلطف على الحنك بحيث يكون أنف الحيوان متجهاً نحو السقف.

قد يتطلب الأمر إعادة توجيه الإبرة قليلاً أثناء مرورها من خلف الحلق. وأي شد يظهر على الإبرة يشير إلى الحاجة لتعديل الوضعية؛ استمر في تمرير الإبرة حتى الوصول إلى المسافة المحددة مسبقاً. يجب أن تمر الإبرة بسهولة، كما لا ينبغي للحيوان أن يلهث أو يختنق عند حقن المادة.

في حالة وجود مقاومة، أو إذا بدأ الحيوان في اللهث أو الاختناق أو تحول لونه إلى الأزرق، توقف فوراً وقم بإزالة الإبرة. وبمجرد إتقان هذه التقنيات، ستتمكن من إعطاء الجرعات بأمان لكل من الجرذان والفئران وتقييد حركتها بفعالية. ومن المهم تذكر أنه أثناء محاولة تنفيذ هذه الإجراءات، فإن تقييد الحيوان بشكل صحيح يجعل الإجراء آمناً لكل من الحيوان والقائم بالعمل.

لا تنسَ أن العمل مع الحيوانات في العلوم هو امتياز ومسؤولية. إن اختيار طريقة التقييد الصحيحة وطرق الإعطاء المناسبة يمثل علامة على جودة البحث العلمي والرفاهية الجيدة للحيوان في آن واحد.