الأعور إجراء ربط البزل

مرحباً، اسمي ميغيل توسكانو من مختبر الدكتورة دينا في قسم الميكروبيولوجيا وعلم الدم بجامعة تيمبل. سنقوم اليوم بشرح كيفية إعداد نموذج الإصابة بـ iCal والثقب في سلالة فئران C 57 Black Seas. نستخدم هذا النموذج في مختبرنا لمحاكاة تعفن الدم البشري.

يتكون هذا النموذج بشكل أساسي من ثقب في السيروم يسمح بإطلاق المواد البرازية في التجويف البريتوني لإحداث إنتان متعدد الميكروبات، مما يؤدي إلى توليد استجابة مناعية مفرطة. وفي هذا النموذج، تتعرض العديد من الأعضاء وأنواع الخلايا المختلفة لتلف غير قابل للإصلاح، وهو ما قد يؤدي في النهاية إلى موت الحيوان.

لنبدأ الآن. تخدير الفأر. تتمثل الخطوة الأولى في تخدير الحيوان عن طريق الحقن داخل الصفاق.

مزيج بنسبة واحد إلى واحد من Ketomine و xylazine. لتجنب التعرض للعض من قبل الفأر، ولتجنب إيذائه، يجب الإمساك بالفأر من الذيل بيد واحدة، بينما يتم الضغط بظهره مقابل الأرض باليد الأخرى.

بعد ذلك، يمكننا إمساك الفأر من مؤخرة الرأس ثم قلبه على ظهره لكشف منطقة البطن. وباستخدام حقنة إنسولين بمقاس 29 gauge، نحقن 20 إلى 30 µL من المخدر في التجويف البريتوني. ولتجهيز الفأر للإجراء، يتم إمساك مؤخرة الفأر وحلاقة بطنه عن طريق الضغط على الذيل و/أو ساق الفأر.

نتحقق من عدم حساسية الفأر للألم، ثم يتم تعقيم البطن؛ أولاً بالفرك بمحلول Betadine، يليه المسح بمسحة كحول أيزوبروبيلي لمدة دقيقة واحدة على الأقل. إجراء عملية فتح البطن: لإجراء عملية فتح البطن، نرفع الجلد في منتصف البطن باستخدام الملقط ونقوم بعمل شق صغير بطول سنتيمتر واحد تقريباً.

بعد ذلك، ارفع منطقة العجان وقم بإجراء شق صغير آخر للكشف عن التجويف البريتوني. وباستخدام ملقط منحني، أمسك بالغشاء البريتوني. ثم حدد موقع الأعور وقم بإبرازه عن طريق تمريره عبر الغشاء البريتوني.

ضعه فوق منطقة البطن. والآن تأتي لحظة الربط. ويعد هذا عاملاً مهماً.

من أجل تحديد شدة النموذج، يمكننا تعديل شدة الإجراء المتبع. فمن خلال تمديد الربط، ستصاب الفئران بتسمم دموي أخف حدة؛ فإذا تم الربط بالقرب من نهاية الأعور، يكون التسمم الدموي متوسط الدرجة، أما إذا تم في المنتصف فيكون التسمم الدموي متوسط الشدة، وإذا تم بالقرب من الصمام اللفائفي الأعوري يكون التسمم الدموي شديداً، وستنعكس شدة الإجراء في نسبة الوفيات.

لا تقم أبداً بربط الصمام اللفائفي الأعوري. الآن قم بإجراء الربط باستخدام خيط جراحي حريري مع عقدة مزدوجة لضمان إحكام الربط، ثم قم بإجراء الثقب؛ أمسك بالأعور وقم بعمل ثقب بعناية بالقرب من موقع الربط، ثم قم بعمل ثقب آخر بالقرب من نهاية الأعور. إن غشاء الأعور رقيق وسيتم ثقبه بسهولة تامة.

يمكننا أيضاً تعديل شدة النموذج باستخدام إبر ذات سماكات مختلفة وإجراء ثقب واحد أو ثقبين. وتعتبر طريقة الثقب المفرد أو المزدوج الموضحة هنا تقنية بديلة لطريقة الثقب المتسلسل النافذ التقليدية. وتكمن ميزة استخدام طريقة الثقب المفرد أو المزدوج في إمكانية التحكم بشكل أفضل في كمية البراز التي يتم إخراجها عند الضغط على الأعور.

أمسك الأعور بكلتا الإصبعين وادفعه برفق لاستخراج كمية صغيرة جداً من البراز. بعد إغلاق فتحة البطن، ارفع البريتون ثم أعد وضع الأعور بعناية داخل التجويف البريتوني.

يجب توخي الحذر الشديد لتجنب ثقب الأعور عن طريق الخطأ أثناء استخدام الملاقط، ويوصى باستخدام ملاقط أكبر حجماً. والآن حان الوقت لإغلاق التجويف الصفاقي. باستخدام خيط جراحي حريري، من المهم جداً التأكد من إغلاقه بإحكام شديد.

نبدأ من أحد جانبي الجرح حيث نقوم بعمل عقدة. نستمر في إجراء الغرز حتى نصل إلى الجانب الآخر عن طريق تمرير خيط الحرير أسفل عروة الثقب السابق. ولإغلاق الجلد، يمكننا استخدام مشابك ميتشل للجروح أو المشابك الانعكاسية باستخدام الأداة المناسبة لإغلاق هذه المشابك.

ضع عددًا كافيًا من المشابك لضمان إغلاق الجرح. قم بإنعاش الفئران عن طريق حقن 1 mL من محلول ملحي دافئ مسبقًا تحت الجلد. باستخدام إبرة قياس 25 gauge، سيؤدي إجراء إنعاش السوائل هذا إلى تحفيز المرحلة مفرطة الديناميكية من تعفن الدم، وبذلك تنتهي العملية.

ضع الفأر تحت مصباح تدفئة بالأشعة تحت الحمراء، أو بدلاً من ذلك فوق وسادة تدفئة، حتى يفيق الفأر من التخدير. وفر الطعام والماء على أرضية القفص وراقب الحيوانات كل ثماني إلى 12 ساعة لرصد أي علامات مرضية. احقن buprenorphine تحت الجلد لتسكين الآلام بعد الجراحة.

من المسكنات البديلة التي يمكن استخدامها عقار T.Tramadol. وتتمثل علامات الإنتان وأعراضه في الحمى، والخمول، وتقشعر الجلد (pelo)، والانتصاب، والإسهال، والتجمع، والوعكة الصحية. وتظهر الحيوانات شديدة المرض انخفاضاً حاداً في درجة حرارة الجسم وبالكاد تتحرك لتجنب المعاناة.

يجب إجراء القتل الرحيم لها في هذه المرحلة. وبذلك نكون قد انتهينا من كيفية تنفيذ ربط الشريان والنموذج الثقبي. نأمل أن تكونوا قد استمتعتم بعرض هذا الإجراء ووجدتموه مفيداً جداً لأبحاثكم قبل البدء في دراستكم الحيوانية. نوصيكم بشدة باستخدام عقول قديمة أو غير مستخدمة للتدريب من أجل تحديد درجة الشدة المناسبة لتجاربكم، وذلك عن طريق تعديل طول الرباط، وسُمك الإبرة، وعدد الثقوب.

وبناءً على ذلك، وداعاً.