أغسطس 7, 2011
توضح هذه المقالة كيفية إجراء الفحص بعد الوفاة الأساسية للماوس أو الفئران ، وجمع من الأجهزة الأساسية ، فضلا عن أكثر من أنواع التحدي عينة من أجل التقييم النسيجي ، الميكروبيولوجية ، وPCR.
الهدف العام من هذا الإجراء هو إجراء تشريح القوارض الأساسي. يتم تحقيق ذلك عن طريق تسجيل المعلومات الأساسية عن أولا. الخطوة الثانية من الإجراء هي فحص الأحشاء
الخطوة الثالثة هي جمع عينات مثل الأعضاء أو الغدد الليمفاوية المساريقية. في النهاية ، يمكن تحديد الحالة الصحية للحيوان من خلال علم الأنسجة المرضية أو تقنيات أخرى. بشكل عام ، سيكافح الأشخاص الجدد في إجراء التشريح لأن تشريح القوارض تعلمت أثناء العمل.
يمكن أن تساعد هذه الطرق في الإجابة على الأسئلة الرئيسية حول صحة في مستعمرة البحث. يعد العرض المرئي لهذه التقنيات أمرا ضروريا حيث يستغرق الأمر وقتا لمعرفة مواقع الأنسجة المختلفة وكيفية التعرف على الأنسجة الطبيعية من غير الطبيعية. قبل القتل الرحيم للحيوان ، اجمع معلومات عن تاريخه وسجل خصائصه الحالية مثل حالته البدنية والسلوك والجنس والعمر والوزن والإجهاد وما إلى ذلك.
هذا السجل هو عمر حيوي للشخص الذي سيقوم بفحص الأنسجة قبل القتل الرحيم للحيوان. تأكد من استخدام معدات الحماية الشخصية المناسبة. قم بإعداد تشريح ، ملقط لوح ، مقص ، ملصقات للحاويات ، المثبت ، الوسائط وأوعية التجميع.
بعد القتل الرحيم للحيوان ، قم بتقييم حالته الجسدية ، وتحقق من وجود تشوهات جلدية ومعطف ، وهزال ، وتجفيف. ابحث أيضا عن دليل على التلاعب الاصطناعي أو الغرسات أو التندب الجراحي على. بعد ذلك ، باستخدام مجهر تشريح ، افحص جميع الفتحات الخارجية بالتفصيل.
وتشمل هذه الأذنين والعينين والأنف والفم والشرج والأعضاء التناسلية. الآن ، ضع على ظهره على لوح التشريح ، وارفع جلده بالملقط واستخدم المقص لقطع الجلد من فتحة الشرج إلى الذقن. بعد ذلك ، اعكس الجلد على الجانبين واقطع جدار البطن والقفص الصدري.
قم بتعريض الأحشاء الصدرية عن طريق عمل قطعتين جانبيا في كل جانب من جوانب القفص الصدري. قطع الحجاب الحاجز. ثم قم بإزالة القفص الصدري عن طريق قطع الجزء العلوي من القص.
الآن ، افحص الأعضاء الصدرية والبطن المكشوفة. تعرف على أي تغيرات في اللون ، أو روائح غير عادية ، أو حجم ، أو اختلافات ، أو أعضاء مفقودة أو مخلعة. افحص تناسق أسطح الأعضاء ولاحظ أي كتل نسجية أو جيوب مملوءة بالسوائل.
لاحظأيضا وجود سائل في أي من التجويف. استمر في الفحص مع الجهاز الهضمي. افحص المساريق بحثا عن تضخم الغدد الليمفاوية أو كتل الأنسجة.
صف محتويات الجهاز الهضمي وتحقق بعناية من الجدران السميكة أو الكتل أو النزيف. لفحص الجزء الداخلي من الكلى ، استخدم شفرة لعمل مقطع طولي من الكلية اليسرى ومقطع عرضي من الكلية اليمنى خارج مركز خط الوسط. افحص الحمة بحثا عن أي تشوهات.
الآن افحص الجهاز البولي التناسلي عند الذكور. التعرف على الحويصلات المنوية والخصيتين والبربخ والحالب والغدد الحلقية عند الإناث. التعرف على الرحم والمبيضين والحالب.
افحص الجهاز البولي التناسلي بحثا عن الانسدادات أو الجيوب السائلة أو النزيف أو التشوهات الأخرى. بعد الانتهاء من هذه الفحوصات ، قم بعزل الأعضاء المستهدفة واستئصالها لمزيد من الفحص. عادة ، يتم جمع القلب والكبد والكلى والطحال أثناء استئصالها.
اغمر كل عضو في مثبت أو اتبع الخطوات الأولى لبروتوكول يتطلب هذه الأنسجة مثل التجميد أو الكيمياء المناعية للحصول على التثبيت المناسب. بشكل عام ، يتم غمر الأنسجة في مادة حافظة مثل 10٪ NBF بنسبة 20 حجما مثبتا لأنسجة ذات حجم واحد. عند العمل مع الفئران ، اجمع نفطة الشعب الهوائية قبل شفط الأنف.
ابدأ بعكس الجلد في الأنسجة تحت الجلد بعيدا عن منطقة عنق الرحم ، وبالتالي تعريض الغدد اللعابية وعضلات عنق الرحم. ثم قم بإزالة تلك الأنسجة لكشف القصبة الهوائية. قم بعمل شق بمقدار ثلاثة ملليمترات في القصبة الهوائية وأدخل ماصة محملة بملليلتر واحد من سائل أخذ العينات في تجويف القصبة الهوائية الموجه كل ثلاثة أشهر.
اغسل سائل أخذ العينات ببطء عبر القصبة الهوائية إلى الرئتين ثلاث مرات. ثم اسحب سائل أخذ العينات وقم بإزالة الماصة من القصبة الهوائية. لن يعود كل السائل إلى الماصة.
لذلك ، كرر العملية إذا كانت هناك حاجة إلى المزيد من السوائل. للاختبار على الفئران. لأخذ عينة من شفط الأنف أو الشفط القصبي ، قم بالوصول إلى ATU البلعومي الأنفي باستخدام مقص معقم.
قطع مفصل الفك السفلي الصدغي وعكس الفك السفلي بعيدا عن الفك العلوي ، مما يؤدي إلى تعريض البلعوم الأنفي لجمع شفط الأنف. أدخل ماصة محملة بملليلتر واحد من سائل أخذ العينات في بلعوم الأنف للفأر، أو تجويف القصبة الهوائية للفئران. يجب توجيه الماصة إلى الكرانيوم ودفعها للداخل.
لذلك يلامس الطرف الحنك الأنفي. بمجرد أن هناك ببطء حقن سائل أخذ العينات. عندما يدخل السائل إلى تجويف الأنف ، سيشكل الغضروف المفصلي عند فتحة الأنف ويجب أن يكون مرئيا أيضا من خلال الحنك الفموي الشفاف.
ومع ذلك، إذا خرج السائل من الفم، فأعد توجيه الماصة. بمجرد حقنها بالكامل، اسحب سائل أخذ العينات من تجويف الأنف إلى الماصة، ثم قم بإزالة الماصة. ابدأ بإمساك القصبة الهوائية بالملقط وقصها فوق الملقط مباشرة.
بعد ذلك ، اسحب القصبة الهوائية برفق لأعلى ، وقم بقص وصلات الأنسجة حتى يمكن استئصال مجموعة الأنسجة الصدرية بأكملها. الآن ، ضع الرئتين بشكل مسطح على سطح العمل ، واربط قطعة من الخيط أو الخيط حول القصبة الهوائية. لا تشد العقدة ، وإلا فلن تتمكن من تمرير الإبرة إلى القصبة الهوائية.
الآن ، املأ حقنة بالمثبت وأدخل الإبرة في فتحة القصبة الهوائية مع تثبيت القصبة الهوائية بالإبرة. باستخدام الملقط ، املأ الرئتين ببطء بالمثبت حتى تنتفخ بالكامل. يختلف حجم المثبت حسب عمر وسلاله وصحته.
إذا ظهرت الأنسجة غير المنتفخة مسطحة ، وإذا كانت مفرطة في النفخ ، فسوف يتسرب السائل الرغوي من الأنسجة بمجرد ملئها ، وشد مادة الخياطة أو الخيط المحيط بالقصبة الهوائية لمنع ارتجاع المثبت من الرئتين. ثم ضع الرئتين المنتفختين في مثبت. ضع الذبيحة على لوح تشريح نظيف في الراقد البطني واستخدم المقص والملقط لإزالة الجلد والعضلات التي تغطي العجل.
ثم اقطع رأس الذبيحة باستخدام مقص صغير. أدخل الشفرة السفلية في الثقبة الماغنوم واقطع خط الوسط للعجل بحركة تصاعدية. الآن ، قم بتعريض الدماغ بالملقط عن طريق سحب العجل المفتوح.
إذا كان أخصائي علم الأمراض يفضل قطع أجزاء من الدماغ أثناء وجوده في الجمجمة ، فضع الجمجمة على الفور مع الدماغ المكشوف في 10٪ NBF. خلاف ذلك ، أمسك الرأس حول الأنف بالملقط أو الأصابع واقلب الجمجمة برفق حتى تساعد الجاذبية الأنسجة على السقوط من الجمجمة. عنايه. حرك ملقط منحنى على طول الحافة الخارجية للدماغ بدءا من الفصوص الشمية.
استمر في تحريك الملقط على طول الجمجمة باتجاه المخيخ ، مع الضغط على الأعصاب برفق بنفس الملقط. عندما يطلق الدماغ مكانه في المثبت ، لتحديد موقع الغدد الليمفاوية المساريقية أولا ، حدد موقع secum الأمعاء على شكل اتصال كبير. الغدد الليمفاوية المساريقية هي كتل صفراء بيضاوية أو كروية من الأنسجة في المساريق المجاور للأعور.
غالبا ما تكون أكثر سمكا وأكثر صلابة في الملمس من المساريق والدهون المحيطة. قد يكون نطاق التشريح مفيدا للتمييز بين الأنسجة في البداية ، ولكن مع الخبرة لن يكون ضروريا. باستخدام الملقط والمقص ، اعزل الغدد الليمفاوية المساريقية ، ثم انقلها إلى أنبوب تخزين لاستخدامها في الثقافة أو تفاعل البوليميراز المتسلسل أو علم الأنسجة المرضية.
بعد الانتهاء من البروتوكول ، يتوفر ما يلي لأخصائي علم الأمراض أو العالم ، وهو تقرير مكتوب عن الحالة الموضوعية والذاتية في القتل الرحيم. وصف موضوعي للأنسجة قبل تثبيتها ، وجميع أعضاء البطن والصدر الرئيسية في المثبت ، والدماغ والغدد الليمفاوية المساريقية وعينات من الأنف والشعب الهوائية التي تستنشق. بمجرد إتقانها ، يمكن أن يستغرق التشريح المختصر أقل من 30 دقيقة.
أثناء تنفيذ هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر تسجيل ملاحظاتك لحالة وأنسجته. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إجراء تشريح القوارض الكامل ، بما في ذلك جمع الرئتين المنفوختين والغدد الليمفاوية المساريقية والدماغ.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تصف هذه المقالة الإجراءات لإجراء فحص تشريحي أساسي بعد الوفاة للفأر أو الجرذ. يتضمن ذلك جمع الأعضاء الأساسية وأنواع عينات أكثر تحديًا للتقييم النسيجي والميكروبيولوجي وتقييم تفاعل البوليميراز المتسلسل.
Comprehensive necropsy and targeted tissue collection in rodents underpin the reliability of preclinical disease models and infectious agent surveillance in biopharma R&D. Standardized protocols for organ, lymph node, and aspirate sampling directly impact the interpretability of histopathology, microbiology, and molecular diagnostics. These capabilities are essential for mechanistic de-risking and translational continuity across discovery and preclinical workflows.
This necropsy and tissue collection protocol is positioned at the interface of in vivo discovery biology and preclinical validation, supporting workflows from hypothesis testing to lead identification and translational research.