موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 3:50 دقيقة • April 30th, 2023
للبدء ، قم بحقن محلول السكوبولامين والتيربوتالين لتقليل الآثار الجانبية الطرفية للبيلوكاربين. بعد ذلك ، قم بحقن محلول بيلوكاربين للحث على حالة الصرع أو SE. سيغير بيلوكاربين استثارة الخلايا العصبية في الدماغ.
بعد ذلك مباشرة ، ضع الماوس في حاضنة دافئة وراقب تحريض SE. ابحث عن إيماءة الرأس والحركات الإيقاعية للأرجل الأمامية أو أي سلوك في المرحلة 3 أو أعلى على مقياس راسين. بعد ذلك ، ضع الفأر في حاضنة درجة حرارة الغرفة واستمر في مراقبة سلوك.
بعد ذلك ، قم بإعطاء حقنة من محلول الديازيبام لإنهاء SE. أخيرا ، قم بحقن محلول سكر العنب للمساعدة في تعافي. بعد تحريض SE ، يدخل فترة كامنة خالية من النوبات حتى ظهور النوبات المتكررة العفوية.
ابدأ بوزن كل فأر ذكر يبلغ من العمر 8 أسابيع. اصنع 2 ملليغرام لكل كيلوغرام من السكوبولامين والتيربوتالين بالإضافة إلى 280 ملليغرام لكل كيلوغرام من محلول بيلوكاربين. بعد ذلك ، قم بحقن المحلول داخل الصفاق في كل فأر وأعد الفئران إلى أقفاصها.
بعد 30 دقيقة من إعطاء السكوبولامين والتيربوتالين ، قم بحقن محلول بيلوكاربين في كل فأر. مباشرة بعد حقن البيلوكاربين ، ضع الفئران في حاضنة بحرارة 28 إلى 30 درجة مئوية للمراقبة. بعد ذلك ، راقب سلوك الفئران حتى يتم إحداث حالة الصرع أو SE. إذا تم الكشف عن نوبات حركية حوفية تتوافق مع المرحلة 3 أو أعلى وفقا لمقياس راسين ، فسجل الوقت وراقب الفئران.
بمجرد أن تستمر النوبات الحركية المستمرة لأكثر من دقيقتين ، ضع الفأر في قفص جديد في درجة حرارة الغرفة واستمر في المراقبة لمدة 3 ساعات لتحديد ما إذا كانت نوباتها المتشنجة مستمرة ويتم تحفيز SE. بعد ذلك ، قم بإنهاء النوبات الحادة السلوكية في 3 ساعات بعد ظهور SE عن طريق حقن 10 ملليغرام لكل كيلوغرام من محلول الديازيبام. بعد حقن الديازيبام، قم بتطبيق 1 ملليلتر من سكر العنب بنسبة 5٪ لكل فأر للمساعدة في التعافي.
في اليوم الأول بعد تحريض SE ، قم بوزن الفئران واحتفظ بها في الحاضنة لمدة يوم إضافي. في اليوم 2 بعد تحريض SE ، قم بوزن الفئران وإعادتها إلى قفص منزلها. توفير طعام رطب لتسهيل الشفاء. أخيرا ، قم بقياس وزن الجسم اليومي للحيوانات حتى 7 أيام بعد بيلوكاربين ، وإذا لم يزد وزن الجسم ، فقم بحقن الفئران بنسبة 5٪ سكر العنب.