موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:17 دقيقة • April 30th, 2023
تقنية تشتت رامان بالرنين المعزز بالسطح أو تقنية SERRS جزيئات تحليلية تحمل صبغة مراسل رامان للتفاعل مع الضوء الساقط والتسبب في تشتت الضوء غير المرن.
ابدأ بمزيج حقن يحتوي على نوعين من المجسات النانوية - المجسات النانوية المستهدفة الموسومة بأجسام مضادة محددة مضادة للمستقبلات تحمل صبغة مراسل مميزة ومجسات نانوية للتحكم غير المستهدفة تمتلك صبغة مراسل مختلفة. حقن هذا التعليق في التجويف البريتوني لأنثى فأر تحمل سرطان المبيض المنتشر. اترك وقتا كافيا لتوزيع المجسات النانوية داخل التجويف البريتوني.
ترتبط المجسات النانوية الوظيفية للأجسام المضادة للمستقبلات المستهدفة بمستقبلاتها المحددة التي يتم التعبير عنها بشكل مفرط على خلايا سرطان المبيض ، بينما تلتصق المجسات النانوية غير المستهدفة بشكل غير محدد بالسطح الحشوي.
قم بالقتل الرحيم للماوس وتثبيته على منصة تصوير في وضع ضعيف. شق البطن جراحيا وإزالة الأمعاء لكشف التجويف البريتوني. صور الماوس تحت مقياس الطيف الضوئي الدقيق رامان.
عند التشعيع بضوء الليزر ، يتسبب كلا النوعين من المجسات النانوية في تشتت الضوء الساقط بشكل مختلف ، ويولد كل منهما توقيعات طيفية فريدة. قم بمعالجة الأطياف لتحديد الوفرة النسبية للمجسات النانوية لتمييز الخلايا السرطانية عن الخلفية الحشوية.
لحقن المسبار النانوي ، قم بتدوير كل من نكهات المسبار النانوي وأعد تعليق الكريات في مخزن MES الطازج بتركيز 600 بيكومولر. امزج الجسيمات النانوية وقم بتحميل 1 مليلتر من المحلول الناتج في حقنة واحدة سعة 1 ملليلتر مزودة بإبرة قياس 26 لكل فأر وحقن الحجم بالكامل داخل الصفاق في بطن كل فأر. بعد ذلك ، قم بتدليك البطن برفق لتوزيع الجسيمات النانوية في جميع أنحاء التجويف البريتوني.
بعد 25 دقيقة على الأقل ، قم بتأمين أطراف محقون تم القتل الرحيم على منصة جراحية واستخدم ملقطا مسننا ومقص تشريح لإزالة الجلد لكشف الصفاق. شق الصفاق. قم بتوصيل اللوحات البريتونية بالمنصة واغسل الجزء الداخلي من التجويف البريتوني بما لا يقل عن 60 مل من PBS. بعد ذلك ، انقل المنصة إلى مقياس الطيف الضوئي الدقيق رامان بتكوين بصري مستقيم في مرحلة آلية وصور البطن تحت معايير التصوير المناسبة.
من الأهمية بمكان أن يكون المستوى البؤري لفحص رامان على سطح معظم الأحشار. إذا كانت الأعضاء خارج المستوى ، فلن تكون الإشارة المكتسبة مفيدة.