موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 4:17 دقيقة • April 30th, 2023
في إشارات paracrine ، تنتج الخلايا وتفرز جزيئات الإشارات التي تحفز استجابات في الخلايا المجاورة. لتقليد إشارات paracrine ، ابدأ بإعداد معلقات أحادية الخلية لخلايا سرطان المبيض وخلايا الظهارة المتوسطة في وسطها المناسب.
بعد ذلك ، خذ إدخالا غشائيا مساميا مقلوبة في طبق ثقافة معقم. قم بتعليق الخلية السرطانية على السطح السفلي لغشاء الإدخال لتشكيل قبة سائلة. احتضان للسماح للخلايا بالاستقرار والالتصاق بالغشاء.
اقلب الملحق لتصريف الوسائط. انقل الملحق إلى طبق مزرعة طازج يحتوي على وسائط نمو لتغذية الخلايا السرطانية الملتصقة بالسطح السفلي للغشاء. الآن ، أضف تعليق الخلية المتوسطة إلى بئر الإدراج. احتضان للسماح للخلايا بالالتصاق بالجانب الآخر من الغشاء ، مما يحرم أي اتصال مباشر بين نوعي الخلايا.
أثناء الاستزراع ، يفرز كلا النوعين من الخلايا عوامل إشارة. تنتشر هذه الجزيئات عبر الغشاء المسامي باتجاه الخلايا المجاورة. ترتبط بمستقبلات خلايا معينة وتحفز شلالات إشارات معقدة في كلا النوعين من الخلايا.
ابدأ بفصل خلايا سرطان المبيض من خليط ملتقى بنسبة 80٪ مع 1 مليلتر من 0.25٪ تريبسين لمدة 40 إلى 60 ثانية ، متبوعا بتحييد التفاعل ب 6 ملليلتر من وسط النمو الكامل. اجمع الخلايا عن طريق الطرد المركزي وأعد تعليق الحبيبات في 5 ملليلتر من وسط النمو الكامل الطازج.
بعد العد ، قم بتخفيف الخلايا إلى 100,000 خلية سرطا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية