موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 4:34 دقيقة • April 30th, 2023
أثناء ورم خبيث لسرطان المبيض ، تنفصل الخلايا الخبيثة عن موقع الورم الأساسي وتبدأ في الدوران داخل التجويف البريتوني. يمكن لهذه الخلايا بعد ذلك تكوين مجموعات أو كرويات تلتصق بطبقة أحادية الخلية المتوسطة المبطنة للتجويف البريتوني. مع نمو الورم ، فإنه يزيل الخلايا الظهارية المتوسطة الأساسية لتسهيل الغزو.
لنمذجة إزالة الظهارة المتوسطة ، ابدأ ببذر الخلايا المتوسطة التي تعبر عن البروتين الفلوري الأخضر أو GFP في طبق ثقافة زجاجي مطلي بالفبرونكتين. يوفر طلاء الفيبرونيكتين مصفوفة تعزز ارتباط الخلايا. احتضان الطبق للسماح للخلايا المتوسطة بالانتشار وتشكيل طبقة أحادية.
بعد ذلك ، انقل معلق من كرويات خلايا سرطان المبيض التي تعبر عن بروتين الفلورسنت الأحمر إلى الطبقة الأحادية الظهارية المتوسطة. قم بتصوير الثقافة لفترة طويلة باستخدام الفحص المجهري الفلوري بفاصل زمني. سوف تستقر الكرات الفلورية الحمراء وتلتصق بالطبقة الأحادية الظهارية المتوسطة الفلورية الخضراء.
تمارس الخلايا السرطانية قوة على خلايا الظهارة المتوسطة ، مما يعطل تقاطعات الخلايا ويغير سلامة طبقة الظهارة المتوسطة. تعمل القوة أيضا على إزاحة الخلايا الظهارية المتوسطة الأساسية ، مما يؤدي إلى حدوث ثقب. اختر إعداد مرشح GFP مناسب لتصور الثقب الناتج كمساحة سوداء في الصورة. قم بقياس المساحة لتحديد مدى إزالة الظهارة الظهارية.
لبدء هذا الإجراء ، قم
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية