موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 4:16 دقيقة • April 30th, 2023
تتكون ظهارة البروستاتا بشكل أساسي من الخلايا الظهارية القاعدية والظهارية اللمعة. تشكل طبقة أحادية من الخلايا القاعدية البطانة الخارجية للغدة وتدعم بقاء الخلايا اللمعية. على العكس من ذلك ، فإن الخلايا اللمعية تبطن التجويف وتفرز بروتينات خاصة بالبروستاتا.
لدراسة التمايز الظهاري للبروستاتا خارج الجسم الحي ، ابدأ بتعليق الخلايا الظهارية للبروستاتا القاعدية. امزج التعليق مع مصفوفة غشاء القاعدية المبردة بالنسبة المطلوبة. Pipet هذا الخليط بجوار قاعدة الجدار الداخلي للوحة ثقافة طاردة للخلايا. حرك الطبق حتى يشكل الخليط حلقة على طول محيط البئر.
احتضان اللوحة للسماح للمصفوفة بالتصلب. استكمل الثقافة بوسائط مفضلة. تدعم عوامل النمو في الوسائط تكاثر الخلايا الظهارية القاعدية. في الوقت نفسه ، تمنع الطبيعة الطاردة للخلايا لطبق الثقافة أي ارتباط بالخلية ، مما يشجع الخلايا على تكوين كرويات ثلاثية الأبعاد داخل المصفوفة.
بمرور الوقت ، تطور الأجسام الكروية الظهارة متعددة الطبقات. تتمايز الخلايا الظهارية القاعدية المبطنة للتجويف في النهاية وتشكل خلايا لمعية إفرازية ، مما يؤدي إلى ظهور هياكل غدية ثلاثية الأبعاد.
ابدأ هذا الإجراء بتحضير خلايا البروستاتا القاعدية واللمعية للفأر كما هو موضح في بروتوكول النص. اغسل حبيبات الخلية في 500 ميكرولتر من الوسائط العضوية للفأر. ثم, أعد تعليق الحبيبات بكثافة خلية 1,000
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية