ما هي أخذ عينات الخلية الواحدة؟

أخذ عينات الخلية الواحدة هي تقنية تُستخدم لعزِل الخلايا الفردية من مجموعة أكبر لتحليل مفصل.

لماذا من المهم عزل الخلايا الفردية؟

يتيح عزل الخلايا الفردية للباحثين دراسة التغاير والخصائص المحددة للخلايا الفردية داخل مجموعة.

ما هي المعدات اللازمة لهذه التقنية؟

يعد المجهر المزوّد بجهاز تحكم دقيق وطرف نانو أساسيين لعزل الخلايا الفردية.

كيف يتم تخزين الخلايا المعزولة؟

عادةً ما يتم تخزين الخلايا المعزولة على الثلج في مخزن جمعي حتى إجراء تحليلات إضافية.

ما أنواع التحليلات التي يمكن إجراؤها على الخلايا المعزولة؟

يمكن استخدام الخلايا المعزولة لإجراء تحليلات جينومية وبروتينية وتحليلات جزيئية أخرى لفهم خصائصها وسلوكياتها.

أخذ عينات أحادية الخلية باستخدام المعالجة الدقيقة: تقنية لعزل الخلايا المفردة من تعليق الخلايا السرطانية

JoVE Encyclopedia of Experiments

Cancer Research

0 views • 2:10 min • April 30th, 2023

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يتيح أخذ العينات أحادي الخلية عزل خلية حية واحدة عن معلق الخلايا السرطانية لتحليلها في اتجاه المصب.

ابدأ العزل بتعليق الخلايا السرطانية. انقل الحجم المطلوب لهذا التعليق على شريحة زجاجية. اترك الشريحة دون إزعاج لفترة من الوقت لتقليل حركة الجسيمات والسماح للخلايا بالاستقرار.

الآن ، انقل الشريحة تحت مجهر مزود بمعالج دقيق متصل بطرف شعري دقيق. تسهل هذه الأداة عالية الدقة التفاعل الجسدي مع الخلايا في العينة على المستوى المجهري.

قم بتوجيه طرف الشعيرات الدموية الدقيقة بالقرب من خلية مستهدفة واحدة. عن طريق تطبيق الشفط ، اجمع الخلية المستهدفة في الشعيرات الدموية الدقيقة. الآن ، قم بنقل الشعيرات الدموية الدقيقة مباشرة إلى أنبوب يحتوي على مخزن التجميع المطلوب.

اخرج محتويات الشعيرات الدموية الدقيقة لتحرير الخلية المفردة التي تم التقاطها في المخزن المؤقت. قم بتخزين الخلية المفردة الحية المعزولة على الجليد حتى مزيد من التحليل.

للتلاعب الدقيق ، انقل 100 ميكرولتر بالكامل من تعليق الخلية إلى شريحة زجاجية. بعد ذلك ، ضع الشريحة الزجاجية على مجهر مزود بمعالج دقيق واترك الخلايا تستقر لمدة 5 دقائق. ثم ، في أنابيب PCR سعة 0.2 ملليلتر ، خلط ماصة 2 ميكرولتر من تحلل الخلية الرئيسية ونقلها على الجليد. استخدم المعالج الدقيق لجمع خلية واحدة في 1 ميكرولتر من محلول ملحي مخزن بالفوسفات 1X.

ثم انقل الخلية مباشرة إلى 2 ميكرولتر من مزيج تحلل الخلية الرئيسي. استخدم جهاز ميكرو فوج سطح المكتب لتدوير العينات بسرعة عند 2000 × جم لمدة 3 ثوان لتجميع السائل في قاع الأنبوب.