الحقن داخل البروستاتا للخلايا السرطانية: تقنية لتوصيل الخلايا السرطانية لإنشاء نموذج فأر سرطان البروستاتا التقويمي

يوفر حقن الورم التقويمي داخل البروستاتا خلايا سرطانية مطابقة للنمط النسيجي لأنسجة البروستاتا مباشرة في غدة البروستاتا للحيوان المتلقي.

للبدء ، قم بإعداد فأر ذكر مخدر في وضع الاستلقاء. قم بعمل شق في البطن في خط الوسط وتشريح العضلات الداخلية لكشف تجويف البطن. حدد موقع أحد فصوص البروستاتا الأمامية. ترتبط فصوص البروستاتا هذه بالانحناء الأصغر للحويصلات المنوية وتقع بالقرب من المثانة البولية.

الآن ، قم بحقن معلق مبرد لخلايا سرطان البروستاتا الممزوجة بمصفوفة الغشاء القاعدي المرغوبة في المحور الطويل لفص البروستاتا الأمامي. تأكد من التسليم الكامل لتعليق الخلية وسحب الإبرة برفق. اسمح للمصفوفة بترسيخ الخلايا بداخلها وتضمينها.

بعد ذلك ، ضع فص البروستاتا مع الحويصلة المنوية مرة أخرى في تجويف البطن. خياطة الشق الجراحي. اسمح للماوس بالتعافي. افحص الفأر أسبوعيا لمراقبة نمو أورام تقويم العظام داخل فص البروستاتا الأمامي.

بعد التأكد من عدم الاستجابة لقرص إصبع القدم ، ضع مرهما على عيون الفأر واحلق كل الفراء من بطن. عقم الجلد المكشوف بثلاث جولات من المقشر الجراحي باستخدام ضمادات معقمة غير ملتصقة متبوعة بمناديل كحولية معقمة. عندما يجف الجلد ، ضع الفأر في وضع ضعيف على سطح نظيف فوق وسادة تدفئة مباشرة تحت هدف المجهر الجراحي النظيف ، وقم بتغطية بستارة معقمة مع ثقب صغير مقطوع فوق البطن.

قم بعمل شق بطول 1 سم في الجلد الخارجي وعضلات البطن الداخلية على طول خط الوسط للبطن متفوقا على القضيب والغدد المعروضة. حدد موقع إحدى الحويصلات المنوية الثنائية وفصوص البروستاتا الأمامية المرفقة التي عادة ما تكون خلفية وجانبية ومتفوقة قليلا على المثانة. اطلب من أحد المساعدين خلط محلول الخلايا السرطانية Myc-CaP matrigel مع ماصة لطيفة وشفط 30 ميكرولترا من الخلايا ببطء في إبرة قياس 28 متصلة بحقنة سعة 50 ميكرولترا.

بعد ذلك ، باستخدام ملقط أنسجة Graefe ، ارفع طرف حويصلة منوية واحدة برفق لخلق توتر على الأنسجة دون ثقب الحويصلة ، وأدخل بعناية شطبة الإبرة الموازية للمحور الطويل لفص البروستاتا الأمامي. قم بحقن الحجم الكامل للخلايا ببطء في الفص ، متبوعا بالتراجع البطيء للإبرة لمنع التسرب.

سيكون الحقن الناجح واضحا من خلال احتقان فص البروستاتا الداخلي. بعناية وثبات ، حافظ على الحويصلة المنوية وفص البروستاتا المحقون خارج الفأر لمدة 30 ثانية تقريبا للسماح للماتريجيل بالتصلب جزئيا داخل الفص. استخدم قضيبا معقما برأس بوليستر لجمع أي تسرب لمحلول الخلية في البطن لمنع تطور الورم غير التقويمي.

الحقن الدقيق داخل البروستاتا أمرا بالغ الأهمية لتطور الورم التقويمي. إن الحرص الشديد على تجنب ثقب الحويصلة المنوية ، وحقن تعليق الخلايا السرطانية ببطء ، وجمع أي تسرب للخلايا سيزيد من نجاح هذا الإجراء.

الآن ، أعد الحويصلة المنوية والفص المحقون برفق إلى البطن دون الضغط على الفص واستبدل أي أنسجة خارجية. باستخدام خيوط إبرة القطع العكسية القابلة للامتصاص 5-0 فيكريل ، أغلق عضلات البطن الداخلية بغرز مستمرة ، متبوعة بإغلاق جلد البطن الخارجي بغرز متقطعة باستخدام خيوط إبرة قطع عكسية غير قابلة للامتصاص 4-0 من النايلون.

بعد ذلك ، قم بإدارة تسكين ما بعد الجراحة وضع الفأر في قفص بدون فراش في منتصف الطريق على وسادة تدفئة مع المراقبة حتى الشفاء التام.

• Prostate Cancer Model - A lab representation to study the progression & treatment of prostate cancer.
• Intraprostatic Injection - Technique of injecting medication or solution directly into the prostate.
• Matrigel - A gelatinous protein matrix used in tumor cell research.
• Orthotopic Tumor Model - Study model wherein tumor cells are implanted in their original organ.
• Seminal Vesicles - Male reproductive glands located near the prostate, integral to the injection procedure.

• Introduce Prostate Cancer Model – Biological method to examine prostate cancer (e.g., intraprostatic injection).
• Key Concepts – Involve steps like shaving, sterilizing, incising and suturing (e.g., prostate biopsy procedure video).
• Underlying Mechanisms – Seminal vesicles and anterior prostate lobes are involved (e.g., prostate cancer real images).
• Connect to Experiment – Demonstrate how injections ensure successful tumor implantation within prostate.

• What is intraprostatic injection used for in a prostate cancer model?
• How is the matrigel cancer cell solution involved in the procedure?
• Why is careful handling of seminal vesicles and prostate lobes crucial in this experiment?

• Practical Applications – Used in surgical training and cancer treatment research (e.g., prostate cancer injection).
• Industry Impact – Benefits medical industries, particularly oncology and urology (e.g., injection for prostate cancer).
• Societal Importance – Advancement in prostate cancer treatment techniques (e.g., injection prostate).
• Link to Scientific Advancements – Continuous improvement of prostate cancer models for research.