موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:45 دقيقة • April 30th, 2023
الالتهام الذاتي هو عملية داخل الخلايا تسهل تدهور المكونات والعضيات السيتوبلازمية غير المرغوب فيها داخل مقصورات هضمية متخصصة تسمى الجسيمات الحالة. لتقييم الالتهام الذاتي ، ابدأ بثقافة ملتصقة لخلايا سرطان البروستاتا التي تعبر عن بروتينات علامة البلاعمة الذاتية المسماة LC3 مقترنة ببروتينات الفلورسنت الخضراء.
بطبيعتها ، تفتقر خلايا سرطان البروستاتا إلى إنزيم أرجينينوسوكسينات سينسيز الضروري لتخليق الأحماض الأمينية الأرجينين. ولذلك فإن هذه الخلايا تعتمد على مكملات الأرجينين الخارجية من خلال الوسائط للبقاء على قيد الحياة والانتشار.
بعد ذلك ، عالج الخلايا بالأرجينين ديميناز أو ADI. يعمل ADI على تحلل الأرجينين الحر في وسائل الإعلام ، مما يؤدي إلى استنفاد الأرجينين. نتيجة لذلك ، تخضع الخلايا للإجهاد الأيضي ، مما يؤدي إلى استجابة ذاتية البعمية داخليا. في الوقت نفسه ، عالج الخلايا بصبغة فلورية حمراء تصنف الجسيمات الحالة داخل الخلايا.
أثناء الالتهام الذاتي ، تتجمع الهياكل الغشائية على شكل كوب والتي تسمى البلعمة حول المكونات السيتوبلازمية التالفة. في النهاية ، يقومون بتوسيع حمولتهم وإغلاقها أثناء الاقتران مع بروتينات علامة البلاعم الذاتية LC3 لتشكيل حويصلات مزدوجة الغشاء أو البلعمة الذاتية. توفر بروتينات LC3 أيضا علامات فلورية للبلعمة الذاتية. ثم تندمج الحويصلات مع الجسيمات الحالة لتشكيل الجسيما
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية