موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 4:03 دقيقة • April 30th, 2023
ابدأ بعينة من أنسجة ورم البروستاتا. أعد تعليقه في مخزن مؤقت للتحلل المبرد لبدء تحلل الخلايا. استخدم الخالط لتحطيم هياكل الأنسجة بشكل أكبر وإطلاق مكوناتها داخل الخلايا. قم بتقطيع العينة على الجليد لضمان تحلل الخلايا بالكامل وقص الحمض النووي لمنع التداخل أثناء معالجة الببتيد. قم بتسخين المحللة لتعطيل البنية الثلاثية للبروتينات وتتكشف عنها.
تشق العوامل المختزلة في المخزن المؤقت روابط ثاني كبريتيد بين بقايا السيستين. بعد ذلك ، تعمل عوامل الألكلة في مجموعات الثيول الخالية من الألكيلات العازلة من السيستين المختزل لمنع إصلاح رابطة ثاني كبريتيد. تسهل عوامل تغيير الطبيعة الإضافية في المخزن المؤقت التمسخ المتحكم فيه وزيادة ظهور البروتينات.
جهاز طرد مركزي لتكوير بقايا الأنسجة وأي ملوثات. اجمع المادة الطافية التي تحتوي على خليط البروتين في أنبوب جديد. أضف إنزيم إندوببتيداز ليسيل لشق روابط الببتيد في البروتينات عند الطرف C من بقايا اللايسين ، لتشكيل ببتيدات كبيرة. علاوة على ذلك ، عالج بإنزيم التربسين لشق روابط الببتيد عند الطرف C من بقايا اللايسين والأرجينين وتوليد ببتيدات أصغر. انقل الخليط إلى وحدة مرشح الطرد المركزي.
جهاز طرد مركزي للسماح للببتيدات المهضومة بالتغلغل عبر مسام غشاء المرشح والتجمع كتدفق من خلال. أي شظايا كبيرة تبقى كمحتجزة.
لحصاد أنسجة الورم ، قم بوزن الورم ، وفي أنبوب اختبار ال
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية