الحفظ بالتبريد القائم على التزجيج: تقنية تبريد فائقة السرعة للحفاظ على العينات البيولوجية في درجات حرارة منخفضة جدا للتخزين طويل الأجل

يسمح

التزجيج ، وهو تقنية حفظ بالتبريد فائقة السرعة ، بتبريد الخلايا والأنسجة الحية وتخزينها في درجات حرارة منخفضة للغاية لفترات طويلة جدا.

لتزجيج أنسجة الورم التي تم حصادها حديثا ، أولا ، خذ الأنسجة على لوحة المزرعة. استئصال أي مناطق نخرية أو مناطق تحتوي على دهون أو جلطات دموية من الورم. اغسل المنديل لإزالة أي آثار للدم.

قطع الأنسجة إلى شرائح بسماكة مناسبة. الآن ، انقل الشرائح إلى أنبوب يحتوي على محلول تزجيج مكون DMSO ، أو ثنائي ميثيل سلفوكسيد ، والسكروز. تعمل هذه المكونات كمواد تبريد لحماية الخلايا من تلف التجمد.

احتضان في درجة حرارة منخفضة. DMSO ، وهو مادة كريمة متغلغلة للخلايا ، تنتشر عبر غشاء الخلية وتحل محل الماء في الخلايا لمنع تكوين بلورات الجليد داخل الخلايا. في الوقت نفسه ، يعمل السكروز ، وهو مادة حاصلة بالتبريد غير المتغلغلة ، خارج الخلية عن طريق تسهيل جفاف الخلايا وتقليل تكوين بلورات الجليد داخل الخلايا للتخفيف من خطر موت الخلايا.

ضع شرائح الورم المتوازنة على حامل الأنسجة. بعد ذلك ، انقل هذه المجموعة إلى نيتروجين سائل لتتجميدها عند 196 درجة مئوية تحت الصفر. ينتج عن هذا التبريد السريع تزجيج العينة الذي يثبت الأنسجة في حالة زجاجية غير متبلورة ، بينما يمنع التركيز العالي للمواد الواقية من التبريد تكوين بلورات الجليد وتلف الخلايا.

تظل الأنسجة المزججة في حالة نشاط التمثيل الغ