عزل الخبايا المعوية: طريقة لعزل الخبايا الكاملة عن الأمعاء الدقيقة لنموذج الفئران

بطانة الأمعاء مغطاة بالإسقاطات أو الزغابات والغزوات أو الخبايا. الخبايا هي الغدد المعوية التي تفرز الإنزيمات الهاضمة بشكل أساسي.

لعزل الخبايا المعوية الدقيقة ، ابدأ بوضع فأر مخدر في وضع ضعيف على لوح التشريح. باستخدام المقص ، قم بتشريح الصفاق طوليا لكشف الجهاز الهضمي.

حدد موقع الأمعاء الدقيقة واسحبها برفق من جسم الفأر. قص الأمعاء من قاعدتها. انقل الأمعاء المحصودة إلى طبق يحتوي على مخزن مؤقت مناسب. قطع الأمعاء طوليا ، وتعريض التجويف.

ضع الأمعاء ، الجانب اللمعي لأعلى ، على لوح تقطيع لكشف الزغابات. حرك شريحة زجاجية بزاوية فوق سطح الأمعاء لكشط الزغابات ، مما يؤدي إلى تعريض الخبايا بأكملها.

اقطع الأمعاء إلى قطع صغيرة ، وانقل القطع إلى أنبوب يحتوي على عازل مثلج لضمان الحد الأدنى من الضرر للخبايا.

بعد ذلك ، تعامل مع EDTA واحتضنها. يتسبب EDTA في ارتخاء الخبايا بأكملها من بطانة الأمعاء. قم بإزالة المحلول المستهلك المحتوي على EDTA. أضف عازلة جديدة وثلاثية باستخدام ماصة لفصل الخبايا عن بطانة الأمعاء.

اجمع المادة الطافية التي تحتوي على الخبايا في أنبوب جديد. استكمل الأنبوب بوسيط ثقافة مناسب وجهاز طرد مركزي لحبيبات الخبايا.

تشريح الصفاق طوليا باستخدام مقص. امسك المعدة بالملقط واقطعها بشكل عرضي إلى نصفين باستخدام مقص الأمعاء من هذه النقطة فصاعدا. اسحب الأمعاء وضعها في طبق بتري يحتوي على PBS. ابدأ