الحقن الوريدي للخلايا السرطانية في الأوعية الدموية الغشائية المشيمية للدجاج: إجراء لإنشاء نموذج سرطان الغشاء المشيمي لدراسة غزو السرطان والورم الخبيث

غشاء المشيمة للدجاج ، أو CAM ، لبيضة الدجاج المخصبة هو الغشاء الجنيني الإضافي المدعوم بشبكة الأوعية الدموية الغنية. يسهل هذا الغشاء الوعائي الشديد الذي يبطن غشاء الغلاف غير الوعائي تبادل الغازات والمواد المغذية مع الجنين النامي.

لإنشاء نموذج سرطان الطب التكسي والبديل في المختبر ، ابدأ بجنين دجاج قابل للحياة ومخصب وخالي من القشرة يحمل CAM متطور بالكامل في طبق.

بعد ذلك ، قم بتجميع جهاز الحقن الذي يحتوي على أنبوب متصل بحقنة تحمل معلقا أحادي الخلية من الخلايا السرطانية المنقولة في مخزن مؤقت مبرد مناسب. قم بتوصيل إبرة زجاجية مخصصة بالأنبوب للحصول على توصيل عالي الدقة أثناء الحقن اللاحق.

الآن ، انقل الجنين تحت المجهر. تحديد الوريد المناسب بالقرب من نقطة التشعب على سطح CAM. حقن معلق الخلية السرطانية في الوريد المحدد وضمان التسليم الكامل. اسحب الإبرة برفق. قم بتغطية الجنين واحتضانه في ظل الظروف المناسبة.

تؤوي الأوعية الدموية الكثيفة داخل طبقة الأديم المتوسط الخلايا السرطانية المحقونة ، مما يسهل تكوين الورم الأولي. في النهاية ، تهاجر بعض هذه الخلايا عبر الأوعية الدموية وتتسرب ، وتغزو السدى المحيط ، حيث تتكاثر لتشكل بؤر نقيلية.

للحقن الوريدي ، قم بتركيز الخلايا على 0.5 إلى 1 مليون خلية لكل مليلتر باستخدام 1x PBS المثلج لتخفيف الخلايا أو إعادة تعليقها. توقع أن هناك حاجة إلى ما يقرب من 1 ملليل