الحقن الوريدي للخلايا السرطانية في الأوعية الدموية الغشائية المشيمية للدجاج: إجراء لإنشاء نموذج سرطان الغشاء المشيمي لدراسة غزو السرطان والورم الخبيث

غشاء المشيمة للدجاج ، أو CAM ، لبيضة الدجاج المخصبة هو الغشاء الجنيني الإضافي المدعوم بشبكة الأوعية الدموية الغنية. يسهل هذا الغشاء الوعائي الشديد الذي يبطن غشاء الغلاف غير الوعائي تبادل الغازات والمواد المغذية مع الجنين النامي.

لإنشاء نموذج سرطان الطب التكسي والبديل في المختبر ، ابدأ بجنين دجاج قابل للحياة ومخصب وخالي من القشرة يحمل CAM متطور بالكامل في طبق.

بعد ذلك ، قم بتجميع جهاز الحقن الذي يحتوي على أنبوب متصل بحقنة تحمل معلقا أحادي الخلية من الخلايا السرطانية المنقولة في مخزن مؤقت مبرد مناسب. قم بتوصيل إبرة زجاجية مخصصة بالأنبوب للحصول على توصيل عالي الدقة أثناء الحقن اللاحق.

الآن ، انقل الجنين تحت المجهر. تحديد الوريد المناسب بالقرب من نقطة التشعب على سطح CAM. حقن معلق الخلية السرطانية في الوريد المحدد وضمان التسليم الكامل. اسحب الإبرة برفق. قم بتغطية الجنين واحتضانه في ظل الظروف المناسبة.

تؤوي الأوعية الدموية الكثيفة داخل طبقة الأديم المتوسط الخلايا السرطانية المحقونة ، مما يسهل تكوين الورم الأولي. في النهاية ، تهاجر بعض هذه الخلايا عبر الأوعية الدموية وتتسرب ، وتغزو السدى المحيط ، حيث تتكاثر لتشكل بؤر نقيلية.

للحقن الوريدي ، قم بتركيز الخلايا على 0.5 إلى 1 مليون خلية لكل مليلتر باستخدام 1x PBS المثلج لتخفيف الخلايا أو إعادة تعليقها. توقع أن هناك حاجة إلى ما يقرب من 1 ملليلتر من تعليق الخلايا لكل 10 أجنة. لتجميع جهاز الحقن ، قم بتركيب إبرة على المحقنة ثم قم بتمديد إبرة المحقنة بقطعة من الأنابيب بطول 3 إلى 5 سم.

كسر طرف إبرة البورسليكات باستخدام ملقط دقيق. قم بتحميل المحقنة ب 50 إلى 200 ميكرولتر من تعليق الخلية السرطانية وأدخل إبرة البورسليكات في الأنبوب. افحص الإبرة بحثا عن انسداد الخلايا وفقاعات الهواء. إذا لوحظ انسداد الخلايا داخل الشعيرات الدموية ، فقم بإزالة الشعيرات الدموية ، وإعادة تعليق الخلايا ، واستبدلها بشعرية جديدة.

استخدم المكبس لدفع أي فقاعات. قم بإزالة غطاء الغطاء ونقل الجنين تحت المجسم. حدد الوريد المناسب الذي سيتم حقنه على سطح CAM ، والذي عادة ما يكون أعرض قليلا من قطر طرف إبرة البورسليكات ويقع في منتصف الطريق بين الجنين وجدار طبق الوزن.

من الأسهل عموما الحقن في النقطة المجاورة مباشرة لتشعب الوريد. اضغط على طرف الإبرة على جدار الأوعية الدموية واضغط برفق في نفس اتجاه تدفق الدم. إذا لزم الأمر ، استخدم قطعة قطن للمساعدة في تثبيت أو تثبيت الوعاء الذي يتم حقنه. اضغط برفق على مكبس المحقنة لمدة 2 إلى 10 ثوان حتى يتم حقن الحجم المطلوب.

تخلص من الجنين في حالة ظهور نزيف مفرط أو تراكم سائل واضح في موقع الحقن. قم بإزالة الإبرة من الطب التكميلي والبديل وامسحت برفق على موقع الحقن بقطعة قطن لإزالة أي دم أو خلايا سرطانية زائدة. قم بتغطية الجنين المحقون في طبق الوزن بالغطاء وأعده إلى الحاضنة. كرر الإجراء حتى يتم حقن جميع الأجنة.

• Intravenous Injection - The process of administering fluids or medication into a vein.
• Injection for Cancer - A technique used to administer cancer treatments.
• Procedure of Intravenous Injection - The steps involved in intravenous injection.
• Chicken Plunger - A device used in the injection process in chickens.
• Apparatus Required for Intravenous Injection - Tools needed to conduct an intravenous injection.

• Intravenous Injection - This is a method used for administering fluids or drugs (e.g., cancer treatments).
• Apparatus Utilization - Assembling the tools necessary for the procedure (e.g., syringe and needle).
• Cell Preparation - Concentrating and resuspending cells in the correct medium.
• Injection Technique - Correctly performing the injection, avoiding clogging and air bubble formation.

• What is procedure for intravenous injection?
• How is the chicken plunger used during the process?
• What is the role of a borosilicate needle in the intravenous injection?

• Practical Applications - This knowledge helps apply injections in biological studies (e.g., cancer research).
• Industry Impact - The process has wide application in healthcare and veterinary sciences.
• Societal Importance - It improves the efficacy of drug administration (e.g., cancer treatments).
• Scientific Advancements - Furthermore, it pushes forward biological research techniques.