موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 2:49 دقيقة • April 30th, 2023
العقد الجذرية الظهرية أو DRG هي مجموعات من أجسام الخلايا العصبية الحسية المستقرة داخل الفقرات على جانبي الحبل الشوكي. وتتمثل وظيفتها الأساسية في نقل الإشارات العصبية الحسية من الجهاز العصبي المحيطي إلى الجهاز العصبي المركزي.
لعزل العقد الجذرية الظهرية ، ابدأ بأخذ العمود الفقري للفئران الذي تم حصاده حديثا. تشريح العمود الفقري لفصل مناطق عنق الرحم والصدر وأسفل الظهر. احتفظ بأقسام العمود الفقري في مخزن مؤقت مناسب لضمان ترطيب الأنسجة.
الآن ، ضع الجزء الصدري بحيث يكون جانبه الظهري متجها لأعلى. قسم القسم إلى نصفين جانبيين. بعد ذلك ، قم بتأمين النصف المقطوع من جزء العمود الفقري ، بحيث يكون الجانب الإنسي لأعلى. افصل الحبل الشوكي المقسم برفق - وهو هيكل أنبوبي طويل - عن عظام العمود الفقري المجزأة للقسم للكشف عن DRG الأساسي.
تظهر DRG ككتل بيضاء مميزة ذات جذور ظهرية وبطنية مدمجة داخل القناة الشوكية. باستخدام ملقط ناعم ، اسحب DRG بحذر لإخراجه من القناة الشوكية. أخيرا ، قم بنقل DRG المحصودة إلى وسائط مناسبة لمزيد من التطبيقات النهائية.
نظف الجلد الظهري للفأر القتل الرحيم بنسبة 70٪ من الإيثانول واستخدم المقص لإزالة العمود الفقري. افصل مناطق عنق الرحم والصدر وأسفل الظهر ، وضع أقسام العمود الفقري في طبق مزرعة بطول 10 سم مع PBS للحفاظ على رطوبة عينات الأنسجة.
باستخدام مقص العظام الرقيق ، افتح عظام العمود الفقري الصدري وعنق الرحم في الجوانب الظهرية والبطنية لفصل العمود الفقري إلى نصفين جانبيين ، وضع أقسام الأنسجة في طبق نظيف بطول 10 سم مع PBS طازج. باستخدام الملقط ، افصل الحبل الشوكي برفق عن عظام العمود الفقري لتصور العقدات الجذرية الظهرية.
ضع أطراف زوج من الملقط الدقيق المثبت تحت كل عقدة ، وأمسك الأنسجة واسحبها من تجويف العظام الذي استقر فيه. بعد الحصاد مباشرة، ضع كل عقدة في وسط مزرعة DMEM مكمل ب 2٪ بنسلين وستربتومايسين أو قلم / بكتيريا و10٪ مصل بقري جنيني أو FBS للمساعدة في منع التلوث البكتيري للأنسجة العصبية.