JoVE Encyclopedia of Experiments
أبحاث السرطان
0 مشاهدات • 2:24 د • April 30th, 2023
الغشاء المشيمي أو CAM هو غشاء خارج الجنين ، يلتصق بشكل وثيق بالغشاء الداخلي للبيضة السليمة. يعد CAM نظاما مثاليا لزرع الورم ونمذجته لأنه غشاء يعاني من نقص المناعة بشكل طبيعي وشديد الأوعية الدموية.
لحصاد CAM الحامل للورم ، أولا ، خذ بيضة دجاج مخصبة قابلة للحياة تحتوي على CAM مطور بالكامل تم زرعه مسبقا بورم. أضف بارافورمالدهيد إلى CAM. يربط بارافورمالدهايد بروتينات الغشاء ، مما يجعل الغشاء أكثر صلابة لتسهيل حصاده.
بعد ذلك ، قم بقص البويضة لفصل الجزء العلوي من قشر البيضة عن باقي البيضة ، مع استمرار الطب التكميلي والبديل الحامل للورم متصلا بالقشرة التي تمت إزالتها. امسك الكام وارفعه على حافة واحدة لفصله بسلاسة عن قشر البيض.
بعد ذلك ، ضع الطب التكميلي والبديل المحصود في بارافورمالدهيد مع توجيه طعم الورم لأعلى. يحافظ بارافورمالدهيد على مورفولوجيا الطب التكميلي والبديل وطعم الورم ، وبالتالي إعداد الغشاء المحصود لمختلف التحليلات النهائية.
في نهاية الحضانة ، ضع البيض على طاولة المختبر. استخدم حقنة لتثقيب ضمادة الفيلم لكل بيضة وقم بتطبيق حوالي 300 ميكرولتر من 4٪ بارافورمالدهيد على كل غشاء المشيمية لتقوية الأنسجة قليلا لتسهيل عملية الحصاد.
باستخدام المقص ، قم بإزالة النصف العلوي من قشر البيض مع توصيل الغشاء المشيمي. قلل حجم القشرة إلى قطر 3 سم تقريبا ، مع الحفاظ على جزء الغشاء المشيمي حيث تم تطعيم عقدة الجذر الظهري والخلايا السرطانية داخل مركز جزء القشرة. بعد ذلك ، أمسك الغشاء المشيمي بالملقط الدقيق وافصل الأنسجة عن قشر البيض لنقلها إلى بئر واحد من صفيحة مكونة من 6 آبار تحتوي على 2 مل من 4٪ بارافورمالدهايد لكل بئر.