موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 4:51 دقيقة • April 30th, 2023
تتكون المصفوفة خارج الخلية أو ECM - المكون غير الخلوي لبيئة الأنسجة - من شبكة معقدة من البروتينات الهيكلية والتنظيمية والسكريات التي تفرزها الخلايا. يوفر ECM الدعم الهيكلي والكيميائي الحيوي للخلايا وينظم نموها.
لتحضير مصفوفة اللسان خارج الخلية ، ابدأ بأخذ لسان فأر تم حصاده حديثا. اغسله بالإيثانول لإزالة طبقة الدهون.
بعد ذلك ، قم بإخضاعه لدورات التجميد والذوبان بالتناوب. يعزز التجميد تكوين بلورات الجليد داخل الخلايا ، بينما يؤدي الذوبان إلى إذابة بلورات الجليد ، مما يؤدي إلى تعطيل الغشاء الخلوي.
الآن ، اللسان في محلول مضاد حيوي لمنع نمو البكتيريا. بعد ذلك ، عالج العضو بمحلول ملحي مفرط التوتر. في وجود تركيز عال من المذاب ، يتدفق الماء من الخلايا ، مما يؤدي إلى تقلصها. تساعد هذه الخطوة في الموت الخلوي والانفصال عن المصفوفة خارج الخلية.
احتضان اللسان في خافض للتوتر السطحي غير أيوني. يعمل الفاعل بالسطح على إذابة الأغشية الخلوية والنووية تماما ، مما يسهل إطلاق المحتويات داخل الخلايا في المحلول.
أخيرا ، قم بتعليق اللسان في محلول يحتوي على أيونات الكالسيوم والمغنيسيوم ، متبوعا بمعالجة النوكليازات. تعزز أيونات الكالسيوم والمغنيسيوم نشاط النوكليازات لتحلل أي أحماض نووية حرة في المحلول.
قم بتخزين أنسجة اللسان منزوعة الخلايا في مخزن مؤقت مناسب حتى مزيد من المعالجة.
بعد عزل الألسنة عن الفئران ا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية