موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 4:55 دقيقة • April 30th, 2023
يشير الغزو حول العصب أو PNI إلى هجرة الخلايا السرطانية على طول الأعصاب وغزوها اللاحق إلى محيط العصب - وهي بيئة مكروية مناسبة لنمو السرطان ورم خبيث.
لتقليد PNI في المختبر ، ابدأ بإضافة قطرة من المصفوفة خارج الخلية أو تعليق ECM على طبق ثقافة بحيث يأخذ شكل نصف الكرة الأرضية. الآن ، احتضان طبق الثقافة لتعزيز السمات الهيكلية والوظيفية للسقالة ثلاثية الأبعاد.
بعد ذلك ، ضع بعناية عقدة الجذر الظهري أو DRG ، وهي مجموعة من الخلايا العصبية الحسية ، في وسط قطرة ECM شبه الصلبة. احتضان لتضمين DRG داخل قطرة ECM.
بعد ذلك ، أضف وسط نمو مناسب واحتضن. تفضل المغذيات المكملة ECM إنبات DRG في نتوءات عصبية صغيرة تسمى الخلايا العصبية التي تنمو شعاعيا باتجاه محيط القطرة.
قم بإزالة الوسيط المستهلك لإعداد قطرة ECM للفحص اللاحق. البذور تلطخ الخلايا السرطانية الملتصقة بالفلورسنت فوق القطرة. بسبب الشكل نصف الكروي ، تتدحرج الخلايا السرطانية وتستقر على طول محيط القطرات.
احتضان طبق الثقافة للسماح بالتفاعل بين الخلايا السرطانية والعصبية. عند النظر إليها تحت المجهر الفلوري ، يمكن رؤية الخلايا السرطانية تتعقب جنبا إلى جنب مع الخلايا العصبية وتهاجر نحو DRG ، مما يؤكد الغزو حول العصب.
لتحضير قطرات المصفوفة شبه الصلبة ، انقل صفيحة زجاجية واحدة قاع البئر من الجليد إلى كتلة ثلجية تحت مجهر التشغيل. ضع طرف ماصة لا تزيد عن 1
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية