استخراج الحبل الشوكي: بروتوكول لعزل الحبل الشوكي الفأري للدراسات في المختبر

0 مشاهدة3:08 دقيقة • April 30th, 2023

لاستخراج الحبل الشوكي ، ابدأ بفأر قتل رحيم في وضعية الانبطاح. رش الإيثانول لمنع أي تلوث محتمل من الفراء.

اقطع خط الوسط من الرأس إلى الذيل وافتح الجلد للكشف عن الأنسجة الأساسية. افحص جمجمة الفأر لتحديد موقع الوصلة القحفية العنقية التي تربط الجمجمة بالعمود الفقري العنقي.

بعد ذلك ، قم بشق الوصلة القحفية العنقية بشكل عمودي لقطع الاتصال بين الرأس والرقبة. تشريح العمود الفقري حتى الفقرة القطنية الخامسة. بعد ذلك ، قم بقطع العمود الفقري عند الفقرة القطنية الخامسة لقطع الاتصال عن مستويات العمود الفقري السفلية.

الآن ، أدر الماوس إلى وضع ضعيف. شق الصفاق وجدار الصدر لكشف كل من تجويف البطن والصدر. قم بإزالة الأعضاء البريتونية وخلف الصفاق للوصول إلى العمود الفقري.

قطع الضلوع لفصل العمود الفقري عن بقية الجسم. أخيرا ، اشطف الحبل الشوكي المعزول بمحلول ملحي بارد لغسل أي ملوثات للدم.

بعد القتل الرحيم للحيوان في غرفة CO2 ، انقع الفراء بنسبة 70٪ من الإيثانول واتركه حتى يجف. قم بتثبيت الفأر في وضع الانبطاح ثم قم بعمل شق خط الوسط يمتد بشكل قحمي من الرقبة الخلفية إلى العمود الفقري القطني.

بعد ذلك ، استخدم الملقط لرفع اللوحات الجلدية بشكل ثنائي وفضح الأنسجة تحت الجلد. ملامسة جمجمة الفأر حتى يتم تحديد الوصلة القحفية العنقية. استخدم مقصا بزاوية عموديا على لقطع عضلات عنق الرحم والعمود الفقري عند تقاطع عنق الرحم. بعد ذلك ، قم بتشريح العمود الفقري ذيليا واستخدم المقص لإجراء قطع ذيلية كاملة في الفقرات القطنية الخامسة.

بعد ذلك ، ضع الفأر في وضع ضعيف ، وبعد إجراء شق على طول خط الوسط من الرقبة إلى البطن ، قم بسحب الجلد بشكل جانبي ثم افتح الصفاق.

في الجمجمة ، افتح جدار الصدر بالمقص. بعد إزالة الأعضاء البريتونية وخلف الصفاق ، استخدم ملقطا وشفرة جراحية لقطع الأضلاع ، تاركا ما يقرب من 5 ملليمترات من الأضلاع بارزة من العمود الفقري. قم بإزالة العمود الفقري من باقي الجسم واغسله مرتين باستخدام PBS البارد.