استخراج الإكسوسوم القائم على الخرز المغناطيسي: تقنية لعزل إكسوسومات معينة من السوائل الحيوية

الإكسوسومات هي هياكل حويصلية خارج الخلية تفرزها الخلايا في سوائل حيوية. لالتقاط الإكسوسومات المحددة من السوائل الحيوية ، ابدأ بأخذ حبات مغناطيسية مطلية بالستربتافيدين في أنبوب.

أضف

إلى هذا الأنبوب الأجسام المضادة للإنسان البيوتينيل. البيوتين الموجود على الأجسام المضادة له تقارب كبير مع الستربتافيدين الموجود على الخرز المغناطيسي. ينتج عن هذا اقتران الأجسام المضادة مع الخرز المغناطيسي.

بعد ذلك ، أضف محلول مانع غني بالبروتين إلى الأنبوب الذي يحتوي على الخرز المغناطيسي المسمى بالأجسام المضادة. ترتبط البروتينات الموجودة في محلول الحجب بالمواقع الحرة على الخرز المغناطيسي وتزيد من خصوصية ارتباط الإكسوسوم.

الآن ، استكمل الأنبوب بعينة من السائل الحيوي الغني بالإكسوسومات. احتضان الأنبوب مع التحريض. تعرض الإكسوسومات الموجودة في السائل الحيوي مستقبلات سطحية محددة ، مما يساعدها على الارتباط بالأجسام المضادة المرتبطة بسطح الخرز المغناطيسي.

بعد ذلك ، ضع الأنبوب في مجال مغناطيسي. تحت تأثير المجال المغناطيسي ، تلتصق الخرزات المغناطيسية المرتبطة بالإكسوسوم بسطح الأنبوب. ثم ، باستخدام ماصة دقيقة ، قم بشفط السائل الحيوي المتبقي من الأنبوب.

أخيرا ، قم بإزالة الأنبوب من المجال المغناطيسي وأضف عازلة مناسبة لإزالة الخرز المرتبط بالإكسوسوم. يمكن استخدام هذه الخرزات المرتبطة بالإكسوسوم لمزيد من التحليل النه