موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 4:41 دقيقة • April 30th, 2023
الغلاف الصالحي في المختبر ، ثقافات ذاتية التجميع للخلايا الظهارية المشتقة من الغدة اللعابية. لزراعة الكرات الكريمة ، ابدأ بأخذ أنسجة الغدد اللعابية البشرية في صفيحة مزرعة.
باستخدام المقص ، افرم الأنسجة إلى قطع رفيعة. بعد ذلك ، استكمل هذه القطع بمحلول تفكك يحتوي على الكولاجيناز والإنزيمات المتباينة واحتضانها. تهضم هذه الإنزيمات المصفوفة خارج الخلية الموجودة في الأنسجة.
علاوة على ذلك ، triturate لتجانس الأنسجة. تطلق هذه الخطوة الخلايا الظهارية وكرات الدم الحمراء في المحلول. بعد ذلك ، استخدم مصفاة خلوية وقم بتصفية الأنسجة المتجانسة في أنبوب مخروطي جديد لإزالة قطع الأنسجة غير المهضومة والحطام. جهاز طرد مركزي لتكسير الخلايا.
بعد الطرد المركزي ، تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق حبيبات الخلية في المخزن المؤقت لتحلل كرات الدم الحمراء. يؤدي هذا المخزن المؤقت إلى تمزق كرات الدم الحمراء الموجودة في معلق الخلية.
الآن ، جهاز الطرد المركزي لتكوير الخلايا الظهارية. أعد تعليق الحبيبات في وسط نمو الخلايا الظهارية المناسب. بالإضافة إلى ذلك ، قم بإعداد لوحة ثقافة الكرة الأرضية عن طريق طلاء بئرها بمصفوفة غشاء القاعدي المسال أو BMM. احتضان للسماح للمصفوفة بالتصلب.
أخيرا ، أضف تعليق الخلية الظهارية إلى الآبار المطلية ب BMM. في وجود وسط النمو ، تلتصق الخلايا الظهارية بطبقة BMM وتتكاثر في الكرات الكروية.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية