تطعيم الورم المشتق من المريض: تقنية لتوليد نموذج فأر تجريبي لتقييم سرطان الخلايا البولية

بالنسبة لسرطان الخلايا البولية المشتق من المريض أو جيل نموذج الفئران UCC ، يتم تلقيح الفأر الذي يعاني من نقص المناعة بخلايا UCC البشرية لدراسة تطور السرطان ورم خبيث.

لبدء التطعيم الغريب ، خذ فأرة مخدرة تعاني من نقص المناعة. حلق الجزء السفلي من ظهر الفأر لكشف منطقة الحوض. الآن ، ضع الماوس في وضع ضعيف مع ملامسة جلده المكشوف مع وسادة مشتتة تعمل كقطب كهربائي تأريض لإكمال الدائرة أثناء التحفيز الكهربائي.

بعد ذلك ، خذ قسطرة وعائية ، وهو أنبوب مجوف رفيع ، متصل بسلك توجيهي. قم بتليين سطح القسطرة وإدخاله في مجرى البول بالماوس للوصول إلى المثانة. ضع قطبا كهربائيا نشطا على سلك التوجيه لتحفيز جدار المثانة. يساعد هذا الإجراء على تمزق طبقة عديد السكاريد المخاطي ، وهو حاجز وقائي للغشاء المخاطي للمثانة ، ويساعد في النقش اللاحق للخلايا السرطانية.

الآن ، قم بإزالة مجموعة الأسلاك التوجيهية للقسطرة الوعائية برفق من مجرى البول. خذ قسطرة وعائية ثانية متصلة بحقنة تحتوي على تعليق خلية UCC وأدخلها في مجرى البول بالفأر. حقن خلايا UCC في مثانة الفأر. تتفاعل الخلايا السرطانية مع الغشاء المخاطي للمثانة لتكوين ورم قد ينتشر في النهاية إلى الأنسجة والأعضاء الأخرى.

لتحضير لحقن خلايا UCC ، استخدم كريم إزالة الشعر لحلاقة الجزء السفلي من ظهر أنثى NOD / SCID التي يبلغ عمرها 6 إلى 8 أسابيع. لإدارة خلايا UCC في المثانة ، أولا ، قم بإعداد آلة الكي الكهربائي أحادية القطب بقوة 4 واط. بعد تخدير الفأر ، ضعه في وضع ضعيف مع أنفه في مخروط أنف الأيزوفلوران وظهره العاري مؤرضا بإحكام على قطب كهربائي مشتت.

قم بتشحيم قسطرة وعائية عيار 24 باستخدام هلام التشحيم ثم أدخل القسطرة الوعائية برفق ولكن بثبات من خلال مجرى البول في الفأر. إذا انحنيت القسطرة عند الدخول ، فأدخل سلك التوجيه في منتصف الطريق في القسطرة لتوفير الاستقرار. بعد ذلك ، أدخل بالكامل سلك التوجيه المستقيم ذو النواة الثابتة 0.64 ملم بعد نهاية القسطرة الوعائية.

امسك الدبوس أحادي القطب بالسلك التوجيهي لمدة 1 ثانية ، مما يسمح بتهيج كهربائي للغشاء المخاطي للمثانة. قم بتوصيل قسطرة وعائية معقمة جديدة بحقنة Luer-Lok سعة 1 مليلتر واسحب ما يصل إلى 200 ميكرولتر من خلايا UCC. قم بإزالة سلك التوجيه والقسطرة الوعائية من مجرى البول ثم أدخل القسطرة الوعائية مع حقنة من الخلايا المتصلة بها.

حقن 50 ميكرولترا من الخلايا في مثانة الفأر ، وللسماح للخلايا بالالتصاق بجدار المثانة ، انتظر بضع ثوان قبل إزالة القسطرة الوعائية. أخيرا ، قم بإزالة الفأر من مخروط الأنف الأيزوفلوران ووسادة التأريض وراقبه لمدة 1 ساعة بعد الإجراء بحثا عن علامات الضيق.