نمذجة ورم المثانة التقويمي في نموذج الفأر: إجراء للإعطاء داخل المثانة للخلايا السرطانية في مثانة الفئران

التقطير داخل المثانة توصيل الخلايا السرطانية إلى المثانة البولية للحيوان المتلقي. للبدء ، قم بإعداد أنثى فأر مخدر في وضع ضعيف على وسادة تسخين لتنظيم درجة حرارة جسمها. أفرغ المثانة من البول.

بعد ذلك ، قم بتجميع قسطرة متصلة بحقنة تحتوي على محلول بولي إل ليسين أو PLL. قم بتليين طرف القسطرة لضمان إدخال مجرى البول بسلاسة والوصول إلى المثانة. بعد الإدخال، قم بحقن محلول PLL ببطء في المثانة.

يمنع التوصيل البطيء ل PLL الارتجاع المثاني الحالبي - ارتجاع البول من المثانة إلى الحالب والكلى. ضع سدادة على القسطرة لمنع التدفق المبكر للخارج. تتفاعل جزيئات PLL الموجبة الشحنة المحقونة وتلتصق بطلاء الجليكوزامينوجليكان سالب الشحنة على الجدار الداخلي للمثانة.

قم بإزالة القسطرة وإخلاء المثانة من محلول PLL غير المرتبط والبول. باستخدام مجموعة أخرى من حقنة القسطرة، قم بحقن معلق الخلايا السرطانية المبردة ببطء في المثانة لمنع الارتجاع المثاني الحالبي وما يتبعه من زرع الخلايا في الكلى. ثبت السدادة على القسطرة.

تعزز الشحنة السطحية المتغيرة لطبقة الجليكوزامينوجليكان تفاعلها الكهروستاتيكي مع الخلايا السرطانية ، مما يسهل التصاقها. قم بإزالة القسطرة وإخلاء المثانة من الخلايا السرطانية والبول غير الملتصقة. بمرور الوقت ، تتكاثر الخلايا السرطانية المزروعة داخل المثانة لإنشاء أورام أولية.

بمجرد تخدير أنثى الفأر ، قم بتوفير الترطيب عن طريق الحقن داخل الصفاق لمحلول هارتمان بمعدل 0.1 مل لكل 10 جرامات من وزن الجسم. كرر هذا كل ساعة أو ساعتين أثناء التخدير.

بعد ذلك ، ضع مرهم عيون معقم على كلتا العينين. أعد وضعه حسب الحاجة. بعد ذلك ، ضع الفأر على مناشف ورقية فوق وسادة حرارية للحفاظ على درجة حرارة الجسم. بعد ذلك ، قم بتأمين الأرجل الخلفية بشريط لاصق. الآن ، ضع ضغطا برفق على منطقة أسفل البطن واجمع البول في أنبوب سعة 1.5 مل.

بعد ذلك ، قم بتحميل حقنة سعة 1 مليلتر مع PLL معقمة وقم بإرفاق قسطرة IV عيار 24 مع إزالة نمط الإبرة. ضع مادة التشحيم على طرف القسطرة. بعد ذلك ، أدخل القسطرة في مجرى البول ، وباستخدام الملقط ، قم بتوجيهها إلى المثانة. توقف عندما تشعر بالمقاومة. بعد ذلك ، قم بإخراج 50 ميكرولترا من PLL بمعدل 10 ميكرولتر كل 20 ثانية لتجنب الارتجاع المثاني الحالبي.

الآن ، اترك القسطرة في المثانة لمدة 20 دقيقة باستخدام سدادة لمنع التدفق. بعد 20 دقيقة ، قم بإزالة القسطرة وإخلاء المثانة من أي محتويات عن طريق الضغط برفق على أسفل البطن. ثم ، باستخدام حقنة سعة 1 مليلتر ، اخرج أي محتويات متبقية من القسطرة.

الآن ، امزج خلايا MB49-PSA جيدا عن طريق سحب العينة وتحميلها في حقنة سعة 1 ملليلتر. قم بتوصيل القسطرة وتشحيمها كما كان من قبل. أدخل القسطرة في المثانة كما كان من قبل وابدأ بحقن الخلايا باستخدام طرد تدريجي يبلغ 10 ميكرولتر لكل 20 ثانية. ثم انتظر ساعة واحدة.

بعد ساعة ، قم بإزالة القسطرة وإخلاء المثانة من أي محتويات. ثم حرر الماوس. ضعه على جانبه البطني وقم بإحيائه بحقن الأتيباميزول. الآن ، راقب الماوس حتى يستعيد الاستلقاء القصي ثم أعده إلى قفص منزله.