حقن الحوض الكلوي الهيدروديناميكي: تقنية لتوصيل الحمض النووي مباشرة إلى خلايا الكلى في نموذج الفئران

لتوصيل الحمض النووي البلازميد مباشرة إلى خلايا الكلى الفأرية ، ابدأ بوضع فأر مخدر في وضع جانبي. قم بإعداد الماوس عن طريق إزالة الفراء الظهري من الجانب. حدد موقع الشق المناسب في الجناح الأيسر ، أسفل القفص الصدري.

قم بعمل شق صغير في الجلد وطبقات العضلات الأساسية. بعد ذلك ، قم بالضغط برفق على تجويف البطن لكشف الكلية من خلال موقع الشق. قم بإزالة الأنسجة الدهنية المتراكبة في العجان جزئيا لتصور الحوض الكلوي.

الآن ، خذ حقنة تحتوي على الحمض النووي البلازميد في مخزن مؤقت للتوصيل الهيدروديناميكي. أدخل الإبرة مباشرة في الحوض الكلوي - جزء مثلث متوسعة من الحالب في الكلى. حقن محلول البلازميد بسرعة بحيث يصل الحمض النووي مباشرة إلى الحمة الكلوية - الجزء الوظيفي من الكلى الذي يقوم بتصفية الدم.

يؤدي التوصيل السريع لحجم كبير من السوائل عبر الحوض الكلوي إلى بناء ضغط عال ، مما يخلق مساما عابرة في غشاء البلازما للخلايا المتني الكلوي. هذا يسهل دخول البلازميدات إلى الخلايا. في النهاية ، تغلق هذه المسام ، مما يحبس البلازميدات داخل الخلايا.

أخيرا ، اسحب الإبرة وأعد الكلية إلى تجويف البطن. خياطة الجلد وطبقات العضلات في موقع الشق.

ارتد قفازات جراحية معقمة وبدءا من جانب الشق ، امسح بمسحة جديدة من الكلورهيكسيدين / الكحول ثلاث مرات بحركة دائرية. الآن ، حدد موقع الشق. اقرص الجلد بالملاقط ، وباستخدام المقص ، قم بق