شفط السوائل من كبيبات الفأر: طريقة لشفط السائل الكبيبي من الفأر باستخدام بزل دقيق بوساطة فوتونين
موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 6:43 دقيقة • April 30th, 2023
في الكلى ، تبدأ الكبيبة - وهي حزمة من الأوعية الدموية الصغيرة المحاطة بكبسولة بومان - بترشيح الدم وتطرد السائل الفضلي إلى مساحة بومان المحيطة. يساعد فحص محتويات السائل الكبيبي على فهم فسيولوجيا الكلى.
لشفط السائل الكبيبي ، قم بإعداد فأر مخدر مع كليته الخارجية جراحيا. الآن ، قم بحقن صبغة الفلورسنت ديكستران في الأوعية الدموية خلف مدار عين الفأر. تتحرك جزيئات الفلورسنت ديكستران عبر مجرى الدم وتصل إلى الكلى.
نظرا للوزن الجزيئي العالي للديكستران ، يتم الاحتفاظ بالصبغة الفلورية داخل الكبيبة ، مما يضفي عليها لونا أخضر. تحت المجهر ثنائي الفوتون ، والذي يسمح بتصور الهياكل العميقة الجذور ، حدد موقع كبيبة مناسبة للحصول على وصول كاف إلى السائل الكبيبي.
بعد ذلك ، قم بمحاذاة طرف ماصة دقيقة مطلية بجسيمات نانوية فلورية حمراء مع المحور الجانبي للكلى. باستخدام معالج دقيق ، قم بدفع طرف الماصة لاختراق الكلى. عندما يصل الطرف إلى الكبيبة المستهدفة ، اضبط معدل الشفط المطلوب لشفط السائل الكبيبي من مساحة بومان.
يشير عدم وجود مضان أخضر داخل طرف الماصة الحمراء إلى قلة النزيف ويؤكد نجاح شفط السائل الكبيبي. بعد ذلك ، اسحب الماصة وقم بتخزين السائل في مخزن مؤقت مناسب لمزيد من التحليل.
بعد التأكد من عدم الاستجابة لقرص إصبع القدم ، ضع مرهما على العينين واستخدم شريطا لتثبيت أطراف الفأر البالغ الذي يتراوح وزنه بين 2
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية