JoVE Encyclopedia of Experiments
أبحاث السرطان
0 مشاهدات • 3:24 د • April 30th, 2023
في مرض السحائية البريمية ، تنتقل الخلايا السرطانية من أعضاء الجسم الأخرى إلى السائل الدماغي النخاعي أو السائل الدماغي النخاعي الموجود داخل طبقات الأنسجة الرقيقة المحيطة بالدماغ.
يسهل الحقن داخل المخ البطيني إعطاء الدواء المباشر في السائل الدماغي النخاعي ، والتهرب من الحاجز الدموي الدماغي.
للبدء ، قم بإعداد فأر مخدر في وضع الانبطاح.
شق الرأس للكشف عن الجمجمة. حدد موقع بريجما - نقطة تقاطع الغرز الإكليلية والسهمية.
باستخدام الحفر الدقيق ، قم بحفر ثقب في الجمجمة على مسافة مناسبة من البريكما للوصول إلى الطبقة السحائية الخارجية للنسيج الضام الكثيف - الأم الجافية.
ثم أدخل الأومايا برفق - منفذ حقن صغير - في الحفرة.
بمجرد الانتهاء من ذلك ، قم بخياطة الجلد المحيط واترك الأومايا لصقها لمدة مثالية.
بعد ذلك ، قم بتوصيل المحقنة المملوءة بتعليق الدواء المطلوب ب ommaya.
بعد تحديد معدل تدفق مناسب ، قم بحقن تعليق الدواء في الأم الجافية.
يوفر الأومايا مسارا معقما لتوصيل الدواء المباشر إلى السائل الدماغي النخاعي في البطينين الدماغيين الدماغيين.
الآن ، افصل المحقنة واترك الأومايا سليمة في الجمجمة للجرعة اللاحقة.
اسمح للماوس بالتعافي.
بمرور الوقت ، تهاجر جزيئات الدواء نحو موقع السرطان وتمنع نمو الخلايا السرطانية وتكاثرها.
قم بتجميع جهاز حقن Murine Ommaya باستخدام منفذ حقن مصغر 25G وقرص فاصل 1 ملم.
استخدم مادة لاصقة معقمة cyanoacrylate لضمان تغلغل ما يقرب من 2.5 ملم من القنية المعدنية في نصف الكرة الدماغية الأيمن وإعداد الجلد وفقا لتقنية معقمة.
قم بعمل شق صغير في الجلد ، متبوعا بتشريح حاد للأنسجة تحت الجلد لكشف الجمجمة. جفف الجمجمة باستخدام أعواد قضيب قطنية مبللة ببيروكسيد الهيدروجين.
حفر ثقب لدغ 0.9 ملم في الجمجمة ، 0.5 ملم خلفي و 1.1 ملم جانبي من البريجما ، لفضح الأم الجافة.
حرك المثقاب الدقيق جانبا وقم بتقطيع العظم المحيط بفتحة الأزيز برفق. قم بتثبيت منفذ حقن على الجمجمة باستخدام مادة لاصقة معقمة cyanoacrylate وأدخلها على عمق 2.5 مم تقريبا.
خياطة الشق باستخدام 4-0 خيوط نايلون غير قابلة للامتصاص في نمط غرزة متقطعة أو خياطة خيط المحفظة. منزل الفئران بعد الجراحة في أقفاص فردية للتعافي.
لجرعة الماوس ، قم بالوصول إلى Murine Ommaya باستخدام محول حقن المنفذ وحقنة هاميلتون. باستخدام الملقط ، أمسك الجزء العلوي من منفذ الحقن المصغر وأدخل محول حاقن المنفذ برفق بالكامل في حاجز المنفذ.
بمجرد إجراء الحقن ، افصل Murine Ommaya عن محول حقن المنفذ باستخدام الملقط.