موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:55 دقيقة • April 30th, 2023
لعزل النوى ، ابدأ بأخذ عينة جديدة من الورم الدبقي المجمد - وهو ورم ينشأ في الخلايا الدبقية في الدماغ - في طبق بتري.
ضع طبق بتري على الثلج لتجنب تدهور الأنسجة.
بعد ذلك ، قم بفرم عينة الأنسجة إلى قطع صغيرة.
أضف عازلة تحلل مبردة مسبقا إلى قطع الأنسجة المفرومة. انقل الخليط إلى الخالط Dounce. باستخدام المدقة ، قم بتجانس الأنسجة لتفكيك الخلايا وبدء التحلل.
الآن ، انقل المتجانس إلى أنبوب طرد مركزي دقيق يحتوي على مخزن مؤقت تحلل جديد.
قم بتعطيل التجانس ميكانيكيا باستخدام طرف ماصة عريض التجويف. تسهل هذه الخطوة إطلاق العضيات السيتوبلازمية من الخلايا.
بعد ذلك ، باستخدام مصفاة خلوية ذات حجم مناسب ، قم بتصفية المتجانس في أنبوب جديد لإزالة بقايا الأنسجة والملوثات الأخرى.
بعد الترشيح ، خذ المرشح الذي يحتوي على عضيات خلوية مختلفة.
قم بالطرد المركزي للمرشح بسرعة منخفضة لتكوير النوى الأكثر كثافة في الأسفل بينما تبقى عضيات الخلية الأخرى في المادة الطافية.
تخلص من المادة الطافية المحتوية على العضية. قم بتخزين الحبيبات الغنية بالنوى الخام في مخزن تخزين مناسب لمزيد من التسلسل النهائي.
ابدأ بنقل 10 إلى 60 ملليغرام من عينة الأنسجة المجمدة الطازجة إلى طبق بتري مبرد مسبقا. افرم أو قطع الأنسجة المجمدة الطازجة بشفرة حلاقة إلى قطع صغيرة على الثلج. أضف 500 ميكرولتر من محلول تحلل النوى المبردة على الأنسجة الموجود
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية