تنقية النوى القائمة على الطرد المركزي المتدرج: تقنية للحصول على جزء فائق النقاء من النوى السليمة باستخدام الطرد المركزي المتدرج للكثافة

لعزل وتنقية النوى السليمة ، ابدأ بأخذ جزء من النوى الخام في أنبوب. يحتوي الكسر على نوى سليمة مع شظايا النوى المكسورة والحطام.

امزج هذا الكسر مع وسط تدرج الكثافة المناسب بحيث يشكل تعليقا بأقل تركيز.

الآن ، حلول الطبقة ذات الكثافة المتزايدة لنفس وسط التدرج أسفل جزء النوى الخام المعد مسبقا لتوليد تدرج كثافة متقطع متعدد الخطوات. تسمح هذه الخطوة لكسر النوى الخام بتكوين نطاق في الجزء العلوي من التدرج.

بعد ذلك ، قم بالطرد المركزي للأنبوب بسرعة منخفضة.

بناء على الاختلافات في الشكل والكتلة ، تهاجر النوى السليمة بشكل مختلف مقارنة بالحطام والشظايا النووية. ينتج عن هذا نوى سليمة تشكل نطاقا منفصلا.

بعد الطرد المركزي ، حدد موقع النطاق المميز الذي يتكون من نوى سليمة عند واجهة محاليل تدرج الكثافة.

باستخدام ماصة، استنشق الطبقات العليا من التدرج لتسهيل الوصول إلى نطاق النوى النقي. اجمع الشريط المحتوي على النوى في أنبوب جديد.

تخيل هذه النوى تحت المجهر الضوئي. تظهر النوى السليمة مستديرة تماما مع غشاء نووي سليم يحيط بها.

أخيرا ، قم بتخزين الجزء النووي النقي لمزيد من التحليل.

أضف 200 ميكرولتر من محلول اليوديكسانول بنسبة 50٪ إلى النوى للحصول على تركيز نهائي يبلغ 25٪ يوديكسانول واخلطه 10 مرات مع الماصة المضبوطة على 300 ميكرولتر.

ثم أضف 300 ميكرولتر من محلول اليوديكسانول بنسبة 29٪ تحت خليط 25٪ باستخدام طرف