تنقية المجموعات السكانية الفرعية للحويصلات خارج الخلية: تقنية لتنقية المجموعات السكانية الفرعية للحويصلات خارج الخلية باستخدام الطرد المركزي الفائق المتدرج للكثافة
موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 4:27 دقيقة • April 30th, 2023
الحويصلات خارج الخلية أو EVs عبارة عن حويصلات نانوية الحجم وغير متجانسة ومرتبطة بالغشاء تفرزها خلايا مختلفة ، بما في ذلك خلايا ورم الدماغ. المركبات الكهربائية الصغيرة هي مجموعة سكانية فرعية تتألف من المركبات الكهربائية المشتقة من الجلد الداخلي والأغشية.
لتنقية المركبات الكهربائية الصغيرة ، ابدأ بأخذ المركبات الكهربائية المستخرجة مسبقا معلقة في مخزن مؤقت مكمل بالسكروز يحافظ على محلول متجانس ويحافظ على السلامة الهيكلية للمركبات الكهربائية.
إلىهذا الحل ، أضف حجما مناسبا من اليوديكسانول - وسيط تدرج كثافة خامل وغير سام - لتحقيق الكثافة المطلوبة.
يعملاليوديكسانول على إذابة البروتينات الملوثة لإزالتها لاحقا.
بعد ذلك ، أضف طبقات من محاليل اليوديكسانول ذات الكثافة المتناقصة على التوالي لإنشاء تدرج كثافة متقطع.
الطرد المركزي الأنبوب بسرعة عالية.
اعتمادا على معدلات تعويم المركبات الكهربائية ، تهاجر المركبات الكهربائية الأكثر كثافة إلى طبقة متساوية الكثافة من وسط التدرج بينما تهاجر المركبات الكهربائية الأقل كثافة إلى طبقة أخف ، وتشكل الملوثات الأكثر كثافة حبيبات في قاع الأنبوب.
الآن ، قم بنقل أجزاء صغيرة من طبقات التدرج في أنابيب جديدة تحتوي على مخزن مؤقت مناسب.
بعد ذلك ، قم بالطرد المركزي للأنابيب بسرعة فائقة في الظروف الباردة.
أثناء الطرد المركزي ، تمنع درجة الحرارة المنخفضة المركبات الكهر
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية