عزل الخلايا النجمية: طريقة للحصول على تحضير نقي للخلايا النجمية القشرية للفأر

تساعد الخلايا النجمية في الثقافة المختبرية على التحقيق في الدور البيولوجي للخلايا النجمية - خلايا الدماغ الأكثر وفرة.

ابدأ بدماغ فأر حديثي الولادة يوضع تحت مجهر تشريح.

قم بإزالة البصيلات الشمية والمخيخ.

قم بإجراء شق خط الوسط بين نصفي الكرة الأرضية لفصل القشرة.

قم بإزالة السحايا لتجنب التلوث في ثقافة الخلايا النجمية من الخلايا الليفية والخلايا السحائية.

انقل نصفي القشرة المخية إلى وسط مثلج وفرم إلى قطع صغيرة.

اجمع القطع القشرية في أنبوب يحتوي على التربسين. التربسين ، إنزيم البروتياز ، يهضم بروتينات التصاق الخلية ، مما يسهل فصل الخلايا.

جهاز طرد مركزي لحبيبات الأنسجة المهضومة.

قم بإزالة المادة الطافية وأضف وسط الخلايا النجمية إلى الحبيبات. الماصة بقوة لإطلاق مجموعة خلايا مختلطة من الخلايا النجمية والخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا السلائف قليلة التغصن أو OPCs.

بذر هذا المعلق الخلية في قارورة ثقافة الأنسجة المطلية بالبولي يسين واحتضنها.

ترتبط الخلايا سالبة الشحنة بالبولي ليسين موجب الشحنة وتنمو على السطح بأكمله لتشكيل طبقة ملتقية.

رج القارورة لفصل الخلايا الدبقية الصغيرة المربوطة بشكل فضفاض و OPCs. قم بإزالة المادة الطافية التي تحتوي على خلايا منفصلة.

أضف التربسين إلى طبقة الخلايا النجمية. اجمع الخلايا وأجهزة الطرد المركزي.

أعد تعليق الحبيبات وقسم الخلايا النجمية إلى قوارير متعددة.

أخي