فحص نفاذية الحاجز الدموي الدماغي المقلد: اختبار في المختبر لتقييم نفاذية BBB Copy لجزيئات التتبع
موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 2:53 دقيقة • April 30th, 2023
ينظم الحاجز الدموي الدماغي ، أو BBB ، الذي يتكون من الخلايا البطانية والخلايا الحمضية والخلايا النجمية ، تدفق وتدفق الجزيئات البيولوجية ويساعد في الحفاظ على توازن الدماغ.
لتقييم نفاذية نموذج BBB في المختبر ، ابدأ بنموذج BBB في المختبر يتكون من خلايا بطانية ملتصقة على الجانب العلوي أو الدموي من إدخال الغشاء المسامي والخلايا النجمية الملتصقة على الجانب القاعدي أو الدماغي من الغشاء.
تتصل الخلايا البطانية مع مصفوفة خارج الخلية بالخلايا النجمية ، وتشكل تقليد BBB.
انقل الحجم المطلوب من الوسائط من الدم وجانب الدماغ إلى صفيحة سوداء متعددة الآبار لقياس التألق الأمثل.
استبدل الوسائط من جانب الدم من المزرعة بوسائط تحتوي على جزيئات تتبع فلورية صغيرة الوزن الجزيئي.
في الثقافة ، تعمل ملامسات الخلايا البطانية النجمية على تعزيز الحاجز الخلوي وتثبيت الحاجز المحكم ، مما يحد من انتشار جزيئات التتبع إلى جانب الدماغ من الثقافة.
علاوة على ذلك ، اجمع كميات مناسبة من الوسائط من الدم والدماغ في النقاط الزمنية المطلوبة. استبدل كلا الجانبين بالوسائط للحفاظ على حجم الوسائط.
أخيرا ، استخدم قارئ لوحة متعدد الآبار لقياس تألق الوسائط المجمعة لتقييم نفاذية نموذج BBB.
تشير شدة التألق المنخفضة من جانب الدماغ إلى انخفاض نفاذية الحاجز الخلوي.
أولا ، اجمع 100 ميكرولتر من الوسط من كل من جانبي الدم والدماغ من تقليد BBTB
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية