عزل خلايا الدماغ من يرقات الزرد: تقنية للحصول على الخلايا العصبية السليمة والضامة والخلايا الدبقية الصغيرة من أنسجة دماغ أسماك الزرد

يتكون دماغ سمك الزرد من الخلايا العصبية - الخلايا العصبية التي تلعب دورا بارزا في معالجة المعلومات. بالإضافة إلى ذلك ، فهو يتألف من مجموعة من الخلايا المناعية الداعمة ، بما في ذلك البلاعم والخلايا الدبقية الصغيرة ، التي تعيش في الفضاء العصبي الداخلي.

لعزل كل هذه الأنواع من خلايا الدماغ عن سمكة الزرد ، أولا ، خذ يرقات الزرد المخدرة في طبق بتري يحتوي على وسائط مناسبة.

تخيل سمك الزرد تحت مجهر مجسمة وقم بتمرير رؤوس اليرقات فوق كيس الصفار للحفاظ على الدماغ سليما.

انقل الرؤوس المقطوعة إلى مجانس مملوء بوسائط مبردة مسبقا ، موضوعة على الثلج. تساعد درجة الحرارة المنخفضة على منع تدهور خلايا الدماغ.

باستخدام مدقة ، قم بتجانس أنسجة دماغ الزرد. يؤدي التجانس إلى تفكيك المصفوفة خارج الخلية ويبدأ في تفكك الخلايا العصبية والضامة والخلايا الدبقية الصغيرة من أنسجة المخ.

تفصل هذه الخطوة أيضا المايلين - طبقة عازلة غنية بالدهون - عن الخلايا العصبية.

مرر الجانس عبر مصفاة لمحاصرة كتل الخلايا الكبيرة.

الطرد المركزي المرشح لتكوير الخلايا وشظايا غمد المايلين. تخلص من المادة الطافية المحتوية على الحطام.

أعد تعليق الحبيبات في وسط تدرج كثافة مناسب وتراكبها بمخزن مؤقت.

قم بتدوير الأنبوب بسرعة منخفضة. تشكل شظايا المايلين الأخف نطاقا مميزا عند واجهة المخزن المؤقت ووسط تدرج الكثافة ، بينما تستقر الخلايا الأكثر كثافة