عزل الخلايا الدبقية الصغيرة عن طريق فرز الخلايا المقترنة بالتلوين المناعي: طريقة تلبوخية مناعية لعزل الخلايا الدبقية الصغيرة من خلايا دماغ أسماك الزرد باستخدام فرز الخلايا المنشطة بالفلورسنت

في ظل الظروف المرضية ، تساعد الخلايا الدبقية الصغيرة المنشطة - البلاعم المتخصصة في الدماغ - في القضاء على مسببات الأمراض وحطام الخلايا. تعبر هذه الخلايا الدبقية الصغيرة عن مستقبلات فريدة تميزها عن الضامة الأخرى.

لعزل الخلايا الدبقية الصغيرة ، ابدأ بزراعة خلايا الدماغ المشتقة من أسماك الزرد المعدلة وراثيا ، معبرة عن جزيئات فلورية محددة في أنواع مختلفة من الخلايا.

تحتوي الثقافة على مزيج من الخلايا العصبية - تعبر عن التألق الأحمر ، والضامة - التي تعبر عن التألق الأخضر ، والخلايا الدبقية الصغيرة غير الفلورية.

الآن ، أضف كاشف مانع واحتضان الثقافة بالتحريض المتقطع. يرتبط كاشف الحظر بالمواقع غير المحددة على الخلايا ويقلل من إشارة الخلفية.

بعد ذلك ، أضف الأجسام المضادة الأولية واحتضنها. ترتبط هذه الأجسام المضادة بمستقبلات محددة يتم التعبير عنها على سطح الخلايا الدبقية الصغيرة.

الطرد المركزي للثقافة وإزالة المادة الطافية التي تحتوي على أجسام مضادة غير مرتبطة. أعد تعليق بيليه الخلية في وسط جديد.

بعد ذلك ، أضف الأجسام المضادة الثانوية المترافقة بصبغة الفلورسنت واحتضنها. ترتبط هذه الأجسام المضادة بالأجسام المضادة الأولية وتضفي لونا أحمر على مركب الأجسام المضادة للخلايا الدبقية الصغيرة.

الطرد المركزي للثقافة وإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة. أعد تعليق الحبيبات في وسط جديد.

قم بتصفية الخلايا