توليد الخلايا الجذعية العصبية المستحثة (iNSCs) من خلايا الدم المحيطية أحادية النواة (PBMNCs): إجراء قائم على فيروس سينداي لإعادة برمجة الخلايا الجذعية العصبية المستحثة في الخلايا الجذعية العصبية المحيطية في الخلايا الجذعية العصبية المحيطية
موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 5:05 دقيقة • July 8th, 2025
لإعادة برمجة الخلايا الجسدية إلى خلايا جذعية عصبية مستحثة أو iNSCs - الخلايا الجذعية التي تمتلك قدرة عالية على التجديد الذاتي والتمايز ، ابدأ بزراعة خلايا الدم المحيطية أحادية النواة في وسط خال من المصل لتوسيع الأرومات الحمراء.
بعد ذلك ، قم بتثبيت معلق الأرومة الحمراء في صفيحة ثقافة. عالج الخلايا بفيروس سينداي المؤتلف أو SeV. تقوم هذه الفيروسات بتشفير عوامل إعادة برمجة النسخ. أجهزة الطرد المركزي لترسيب الخلايا واحتضانها.
بعد اندماج SeV في غشاء الخلية المضيفة ، يخضع جينوم الفيروس للنسخ متبوعا بالترجمة في السيتوبلازم. يؤدي التعبير خارج الرحم لعوامل النسخ إلى تشغيل عملية إعادة برمجة الخلية دون دمج الجينات في جينوم المضيف.
الآن ، قم بالطرد المركزي للثقافة لإزالة الفيروسات. أعد تعليق الخلايا المنقولة في وسط مناسب ، متبوعا بالطلاء. علاوة على ذلك ، جهاز الطرد المركزي لإزالة الحطام الخلوي. قم بإعادة تعليق الخلايا في وسائط iNSC.
بعد ذلك ، قم بزرع الخلايا في طبق مغطى بالبروتين. تلتصق الخلايا بطبقة البروتين في اللوحة. استكمل الخلايا الملتصقة بوسائط iNSC في أيام بديلة. بعد أسبوع من الثقافة ، استبدل الوسائط المستهلكة بوسائط iNSC جديدة يوميا.
تحافظ عوامل النمو والمكونات الكيميائية في الوسائط على التجديد الذاتي وتدعم تعدد القدرات لمجموعة فرعية من الخلايا المنقولة ، وتعيد برمجتها بالكامل إلى iNSCs
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية