تحضير السقالة المصنفة MSC: تقنية لتحضير سقالة بذرة بالخلايا الجذعية الوسيطة للزرع الجراحي في نموذج الفئران
موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 4:49 دقيقة • July 8th, 2025
تنتج الخلايا السرطانية عوامل موجهة كيميائية لجذب الخلايا الجذعية الوسيطة أو الخلايا الجذعية الوسيطة من الأوعية الدموية باتجاه موقع الورم.
لدراسة تأثير هذه الخلايا على نمو الورم في المختبر ، ابدأ بأخذ ركيزة سقالة معقمة. انقله إلى صفيحة جيدة تحتوي على الوسائط المرغوبة لتبليل السقالة مسبقا. ضعه على سطح جاف لإزالة الوسائط الزائدة الملتصقة بالسقالة لتحسين التصاق الخلايا. انقل السقالة المجففة جزئيا إلى بئر طازجة. ضع قطرة من تعليق MSC على السقالة.
بالإضافة إلى ذلك ، أضف المزيد من الوسائط في زوايا البئر لإنشاء غرفة ترطيب تمنع تبخر الوسائط من القطرة أثناء الحضانة اللاحقة. احتضان للسماح ل MSCs بالالتصاق بسطح السقالة. اقلب السقالة لكشف السطح غير المصنف. ماصة قطرة جديدة من تعليق MSC على هذا الجانب ودع MSCs تلتصق.
بعد أن تلتصق الخلايا الجذعية الجذعية بجانبي السقالة ، قم بتغطيتها بمزيد من الوسائط لضمان اتصال جميع الخلايا بالوسائط. احتضن حتى تنمو الخلايا الجذعية الجذعية وتتسلل داخل الفجوات والمسام للسقالة. سقالة MSC المصنفة جاهزة للزرع الجراحي.
قم بإعداد السقالات قبل 48 ساعة من الزرع في الفئران عن طريق قطع سقالات PLA أولا إلى قطع بحجم تجويف الاستئصال تبلغ حوالي 2 × 2 ملليمتر. عقم السقالات عن طريق غمرها في 70٪ من الإيثانول لمدة 15 دقيقة. بعد 15 دقيقة ، اغمر السقالات في PBS. بعد ذلك ، ضع السقالات ف
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية