عزل الشعيرات الدموية الدماغية عن الدماغ البشري: طريقة محسنة لاستخراج الشعيرات الدموية الدماغية من أنسجة الدماغ البشري

الشعيرات الدموية الدماغية هي عنصر حيوي في الحاجز الدموي الدماغي - حاجز شبه منفذ يسمح بالحركة الانتقائية للمواد المذابة بين الدم والدماغ. لعزل الشعيرات الدموية الدماغية ، ابدأ بأنسجة المخ البشرية الطازجة. قم بإزالة السحايا وقطع المادة البيضاء.

افرم أنسجة المخ إلى أجزاء أصغر. انقل الأجزاء إلى الخالط الذي يحتوي على مخزن مؤقت مناسب وتجانس. يؤدي التجانس إلى تفكيك الأنسجة ، وإطلاق الشعيرات الدموية وحطام الأنسجة في المحلول.

انقل الجانس إلى أنبوب جديد وأضف الحجم الأمثل لوسط تدرج الكثافة المناسب. الطرد المركزي الحل لحبيبات الشعيرات الدموية. ينتج عن وسط تدرج الكثافة الزائد أو القليل جدا انخفاض الإنتاجية الشعرية. قم بإزالة المادة الطافية.

أعد تعليق الحبيبات في ألبومين مصل الأبقار أو المخزن المؤقت المكممل ب BSA. يعمل BSA على استقرار الإنزيمات الهاضمة والحفاظ على السلامة الهيكلية للشعيرات الدموية. بعد ذلك ، قم بتصفية المحلول بمرشح مناسب لإزالة الأوعية الكبيرة وحطام الأنسجة.

ثم قم بتمرير المرشح من خلال مرشح شبكي أصغر. يحتفظ هذا المرشح بالشعيرات الدموية الدماغية ويسمح بمرور الحطام الأصغر وخلايا الدم الحمراء. بعد ذلك ، اقلب الفلتر واغسل الشعيرات الدموية في أنبوب جديد مع مخزن مؤقت مكمل ب BSA.

الطرد المركزي المحلول وإزالة المادة الطافية. أعد تعليق الشعيرات الدموية النقية في المخزن المؤقت وقم بتخزينه