JoVE Encyclopedia of Experiments
أبحاث السرطان
0 مشاهدات • 4:40 د • July 8th, 2025
يتكون الحاجز الدموي الدماغي أو BBB من خلايا بطانية مرتبة بشكل وثيق متصلة من خلال تقاطعات ضيقة. يشكل هذا ختما مضغوطا يقيد حركة الجزيئات إلى الدماغ. لاختراق BBB ، قم بإعداد فأر مخدر عن طريق تثبيته في وضع الانبطاح على وحدة تجسيمية.
بعد ذلك ، أدخل قسطرة في وريد الذيل واشطفها بمحلول مضاد للتخثر لتجنب تخثر الدم. خذ تعليقا من الفقاعات الدقيقة - كريات مجهرية من الغاز محاطة بطبقة دهنية. حقن الفقاعات الدقيقة في الوريد الذيل الجانبي. تدخل هذه الفقاعات الدقيقة إلى مجرى الدم ، وتصل في النهاية إلى الدماغ.
بعد ذلك ، حدد موقع الدماغ وقم بتطبيق هلام الموجات فوق الصوتية على البقعة المقابلة على الرأس لتحسين توصيل الموجات. زرع محول طاقة بالموجات فوق الصوتية فوق المنطقة المحددة على رأس الفأر. استخدم محول الطاقة لتطبيق موجات فوق صوتية قوية ومستهدفة.
بسبب الضغط الصوتي من الموجات فوق الصوتية ، تتوسع الفقاعات الدقيقة بسرعة وتتقلص عدة مرات. تتسبب هذه التذبذبات في حدوث عمليات صوتية - تعطيل الوصلات البطانية الضيقة - مما يؤدي إلى إنشاء فتحات موضعية في BBB. تسهل هذه الفتحات توصيل الفقاعات الدقيقة إلى الدماغ.
أخيرا ، قم بحقن المحلول المحتوي على الصبغة داخل الأوعية الدموية. تتسرب جزيئات الصبغة من الأوعية من خلال الفتحات العابرة في BBB. يشير وجود صبغة في دماغ الفأر إلى نجاح الصوت.
لإدارة الفقاعات الدقيقة لفتح BBB ، أدخل قسطرة وريد الذيل قياس 26 إلى 30 وقم بغسل الوريد بحجم صغير من محلول الهيبارين. قم بتأمين القسطرة بشريط منديل لمنع الانفصال. إذا نجحت القسطرة ، املأ القسطرة بمحلول الهيبارين لتجنب تخثر الدم.
ضع على المنصة التجسيمية التي تنظم درجة الحرارة لتجنب انخفاض حرارة الجسم. قم بإصلاح رأس باستخدام قضيب لدغة وقضبان أذن وقم بلصق الذيل والقسطرة على المنصة. إصلاح جسم الماوس مع حزام.
ضع المنصة التجسيمية مع الماوس المركب في طريقة التصوير والتقط صورا للحيوان. حدد ما إذا كان قد تم وضعه بشكل صحيح على المنصة. حدد موضع باستخدام العلامات الائتمانية متعددة الوسائط جنبا إلى جنب مع خط أنابيب معالجة الصور وفقا لنقطة تركيز محول الطاقة. حدد المنطقة المستهدفة عن طريق وضع مخطط دماغي فوق صورة الأشعة السينية المكتسبة، أو باستخدام صور BLI لتحديد مركز الورم.
قبل وضع محول الطاقة ، قم بحماية فتحتي أنف وفم بشريط لاصق لمنع هلام الموجات فوق الصوتية من التدخل في التنفس. ضع جل الموجات فوق الصوتية فوق رأس الماوس لتوصيل الصوت بشكل صحيح. سجل تجويف الفقاعات الدقيقة باستخدام هيدروفون الإبرة ، والذي يتم وضعه في المنطقة المجاورة مباشرة للعظم القذالي.
بناء على قيم المعايرة ، قم بتوجيه محول الطاقة إلى الموضع الصحيح فوق. قم بتطبيق الإعدادات التي تم تكوينها مسبقا على جميع الأجهزة المتصلة لاستهداف منطقة الدماغ التي تهمك. بعد وضع محول الطاقة في الموضع الصحيح ، قم بإذابة وتنشيط الفقاعات الدقيقة كما هو موضح من قبل الشركة المصنعة.
قبل حقن الفقاعات الدقيقة ، اغسل قسطرة وريد الذيل بالمحلول الملحي لتأكيد وصول وريد الذيل. ابدأ مسار الرنين وحقن الفقاعات الدقيقة في نفس الوقت. في الوقت نفسه ، سيكتشف الهيدروفون بالإبرة ويتحقق من تجويف الفقاعات الدقيقة في الوقت الفعلي. إذا رغبت في ذلك ، قم بإعطاء عامل تباين داخل الأوعية الدموية أو دواء بعد التنقيب. راقب حتى نقطة زمنية محددة مسبقا.