JoVE Encyclopedia of Experiments
أبحاث السرطان
0 مشاهدات • 5:11 د • July 8th, 2025
الغزو حول العصب هو ظاهرة نقيلية نادرة حيث تنتشر الخلايا السرطانية بعيدا عن موقع المنشأ لغزو الفضاء المحيط العصبي داخل الأعصاب. توفر البيئة المكروية للأعصاب بيئة مناسبة لنمو السرطان وانتشاره.
لمحاكاة الغزو حول العصب في الجسم الحي ، قم بإعداد فأر مخدر في وضع الانبطاح. قم بعمل شق صغير متوازي أسفل عظم الفخذ - عظم الفخذ. افصل عضلات الفخذ للكشف عن العصب الوركي الأساسي - العصب الأكبر والأكثر سهولة في الجسم.
ينشأ العصب الوركي في أسفل العمود الفقري ويمتد عبر عضلات الحوض إلى كل ساق. ينقل إشارات للحركة المنسقة للأطراف السفلية. بعد ذلك ، قم بإزالة العضلات المحيطة من العصب واسحبها للخارج باستخدام ملعقة معقمة لدعم الحقن.
الآن ، خذ حقنة مملوءة بتعليق الخلايا السرطانية وحقنها بالتوازي في العصب. يؤكد الانتفاخ المرئي في العصب نجاح الحقن ، بينما يشير أي تسرب حول موقع الحقن إلى محاولة فاشلة. باختصار ، اسمح للخلايا بالاستقرار داخل العصب.
ثم اسحب الإبرة برفق وأعد وضع العضلات. بعد ذلك ، خياطة الشق. اسمح للماوس بالتعافي. في النهاية ، تبدأ الخلايا السرطانية في الهجرة من موقع الحقن باتجاه الحبل الشوكي ، مما يؤكد الغزو حول العصب.
في اليوم السابق للجراحة ، قم بإزالة الفراء على طول عظم الفخذ على الجانب الظهري لفئران C57BL / 6J البالغة من العمر 8 أسابيع باستخدام مقص جراحي أو عامل كيميائي لإزالة الشعر. في يوم الجراحة ، قم بتطهير المرحلة ، وتخدير الفئران باستخدام 2٪ isoflurane في غرفة الحث ، وقم بتطبيق مرهم بيطري على العينين لمنع الجفاف تحت التخدير.
حقن كمية مناسبة للوزن من المسكن تحت الجلد ونقل الفأر إلى مخروط الأنف في منطقة الجراحة. يتم توفير الدعم الحراري طوال العملية الجراحية. ضع الفأر المخدر على جانبه البطني وقم بتأمين كل طرف برفق بشريط مضاد للحساسية لخلق توتر خفيف في الطرف المراد حقنه.
نظف موقع الحقن بمسحة البيتادين ، ثم مرة أخرى بالكحول بنسبة 70٪. كرر هذه العملية مرتين أخريين وتأكد من عدم وجود شعر متساقط في المجال الجراحي. كخطوة أخيرة ، ضع محلول البيتادين على منطقة الجراحة. بعد ارتداء القفازات المعقمة ووضع الستارة المعقمة ، استخدم أداة معقمة مخصصة لتطبيق قرصة إصبع القدم قبل عمل شق أسفل الستارة.
بعد ذلك ، استخدم مقصا صغيرا معقما لعمل شق بطول 1 سم على بعد حوالي 2 ملم من عظم الفخذ وبالتوازي معه. اسحب الجلد بالملقط بشكل جانبي لكشف العضلات تحتها. افصل عضلات الألوية الكبيرة والعضلة ذات الرأسين الفخذية على طول مستوى اللفافة وفضح العصب الوركي تحتها. حرر العصب من العضلات المحيطة باستخدام تشريح حاد.
اسحب 3 ميكرولترات من الخلايا السرطانية من الحبيبات إلى حقنة معقمة سعة 10 ميكرولتر. ضع ملعقة معدنية صغيرة أسفل العصب عند نقطة الحقن للحصول على الدعم. أثناء التخيل باستخدام مجهر التشريح ، احتفظ بالإبرة موازية للعصب وأدخلها في العصب. احرص على عدم ثقب الجزء الخلفي من العصب.
حقن الخلايا ببطء في العصب خلال 5 ثوان. يشير تكوين لمبة في منطقة الحقن إلى حقنة جيدة. اترك الإبرة في مكانها لمدة 3 ثوان لتقليل التدفق العكسي قبل إزالة الإبرة برفق. يعد الحقن الصحيح للخلايا السرطانية في العصب الوركي أمرا بالغ الأهمية. إذا تم حقن الخلايا خارج العصب ، فسوف يعاني اتساق الغزو. ومع ذلك ، مع الممارسة والخبرة ، هذا نادر جدا.
بعد الحقن ، أعد العصب إلى موضعه الأصلي وقم بتغطية العصب بالعضلات العلوية. عالج الفئران بتسكين مناسب ثم أغلق الجلد ب 5-0 خيوط نايلون. ضع الفأر بمفرده في قفص نظيف للمراقبة وقدم الدعم الحراري أثناء التعافي حتى يستعيد وعيه الكافي للحفاظ على الاستلقاء القصي.