توصيل الخلايا الجذعية العصبية العلاجية (NSCs) داخل الأنف في نموذج الفئران: إجراء لتوصيل الخلايا الجذعية العصبية العلاجية المحملة بالورم في نموذج الفأر الحامل لورم الدماغ

للبدء ، أخضع ثقافة الخلايا الجذعية العصبية أو الخلايا الجذعية العصبية لظروف منخفضة الأكسجين. يسهل هذا التكييف المسبق تعزيز انتشار NSC وقدرات استهداف الورم. بعد ذلك ، قم بحصاد NSCs ومعالجتها بالتركيز المطلوب من فيروس حال للأورام المتماثل بشكل مشروط. احتضان لتحميل الفيروسات في الخلايا.

الآن ، قم بالطرد المركزي للثقافة لإزالة الفيروسات غير المرتبطة. أعد تعليق الخلايا العصبية المحملة بالفيروسات في مخزن مؤقت مناسب. في هذه الأثناء ، ضع فأر مخدر يحمل ورم في الدماغ في وضع ضعيف لتسهيل الوصول إلى فتحتي الأنف. قم بإدارة NSCs المحملة بالفيروسات بعناية في كل فتحة أنف من الفأر ، وكرر ذلك على فترات زمنية قصيرة.

اسمح للماوس بالتعافي. تتجاوز الخلايا العصبية العصبية التي يتم إعطاؤها عن طريق الأنف في تجويف الأنف الحاجز الدموي الدماغي لدخول الدماغ. داخل الدماغ ، يتكاثر الفيروس داخل هذه الخلايا المشروط مسبقا وينتقل إلى موقع الورم ، ويحمي نفسه من جهاز المناعة. بمرور الوقت ، تتفاعل الجسيمات الفيروسية المنبعثة من الخلايا العصبية الوطنية وترتبط بمستقبلات سطح خلية معينة بشكل مفرط في التعبير عنها على الخلايا السرطانية.

بعد استيعاب الفيروس ، تتكاثر هذه الفيروسات المتكاثرة بشكل مشروط بشكل تفضيلي في الخلايا السرطانية وتسبب تحلل الخلايا. تطلق الخلايا السرطانية المحللة جزيئات فيروسية تصيب الخلايا السرطانية المحيطة ، مما يؤدي إلى سلسلة من العدوى وتحلل الخلايا السرطانية. يكشف تحلل الخلية عن مستضدات الورم ، مما ينشط استجابة مناعية ضد الخلايا السرطانية.

لتحميل الخلايا الجذعية العصبية البشرية بفيروس حال للأورام ، قم بإصابة الخلايا الجذعية ب 50 تكرارا شرطيا من جزيئات الفيروس الغدي لكل خلية وفقا لبروتوكولات تعدي الفيروس الغدي القياسية لمدة ساعتين في درجة حرارة الغرفة مع النقر الدوري. بعد ذلك ، اغسل الخلايا ثلاث مرات بوسط جديد لإزالة أي جزيئات فيروسية غير مرتبطة وتعليق الخلايا في محلول ملحي معقم للتوصيل داخل الأنف.

عندما يتم تعديل الخلايا على النحو المناسب تجريبيا ، ضع الحاملة للورم المخدرة في وضع ضعيف على ستارة نظيفة فوق وسادة حرارية وضع وسادة مبطنة تحت الرؤوس للحفاظ على فتحتي الأنف بزاوية منتصبة. يجب أن تكون مادة الوسادة إما من البلاستيك القابل للمسح بالكحول أو مناشف ورقية ملفوفة يمكن التخلص منها لتجنب التلوث عبر.

عندما تكون الفئران في موضعها ، استخدم ماصة دقيقة لتوزيع 2 ميكرولتر من الخلايا الجذعية العصبية البشرية التجريبية ذات الأهمية في كل فتحة أنف للفأر الأول ، مما يؤكد بصريا شفط القطرة قبل تطبيق الحجم التالي من الخلايا. كرر التسليم لكل ماوس بدوره. ثم انتظر 5 دقائق وقم بتطبيق الجولة التالية من الخلايا. عندما يتم إعطاء جميع الجولات الأربع من الخلايا ، ضع في غرفة التعافي مع المراقبة حتى الشفاء التام.

• Neural Stem Cells (NSCs) - Preconditioned cells exposed to low oxygen for improved proliferation.
• Cell Washing Procedure - A method to remove unbound entities, in this context, virus.
• Stem Cell Flow Chart - A graphical representation to outline the stem cell procedures.
• Murine Stem Cell Virus - An oncolytic virus used in research for its tumor-targeting properties.
• Stem Cell Delivery - Process of injecting stem cells (here, into nostrils).

• Introduce NSCs - Neural stem cells enhanced for tumor-targeting (e.g., NSCs).
• Key Concepts - Overview of oncolytic virus utilization within NSCs (e.g., theory of stem cell delivery).
• Underlying Mechanisms - NSCs carry virus to brain tumors, leading to cell lysis (e.g., mechanisms of murine stem cell virus).
• Connect to Experiment - Experiment uses virus-loaded NSCs injected into mice nostrils, targets brain tumor.

• [Question 1] What are neural stem cells and how do they target tumors?
• [Question 2] How does the process of cell washing work?
• [Question 3] What role does the murine stem cell virus play in tumor destruction?

• Practical Applications - Invasive brain tumor treatments (e.g., using NSCs).
• Industry Impact - Potential benefits for cancer treatment sectors (e.g., healthcare).
• Societal Importance - Improved life quality of brain tumor patients (e.g., via better treatment options).
• Link to Scientific Advancements - A step forward in oncolytic virus research and NSC technology.