عزل أوعية دماغ الفئران: بروتوكول لعزل الأوعية السليمة من عينة دماغ الفئران

أوعية الدماغ محاطة بطبقة من الخلايا البطانية المتصلة بإحكام. تحتوي هذه الخلايا على غشاء أساسي حولها جنبا إلى جنب مع المكونات الخلوية مثل الحمضات والخلايا النجمية.

لعزل الأوعية الدماغية عن الخلايا العصبية المحيطة والخلايا الدبقية ، خذ دكوبا يحتوي على دماغ الفأر المغمور في مخزن مؤقت للتجانس. افرمها إلى قطع صغيرة. تجانس أنسجة المخ لفصلها ، وإطلاق الخلايا العصبية والخلايا الدبقية والأوعية الدماغية. يعطل هذا العلاج أيضا غمد المايلين المحيط بالخلايا العصبية.

انقل المتجانس إلى أنبوب وجهاز طرد مركزي لتكوير الأوعية. تبقى المكونات الأخف مثل الخلايا العصبية والخلايا الدبقية في المادة الطافية بينما يشكل المايلين طبقة واجهة كثيفة تحيط بالحبيبات.

تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق حبيبات الوعاء بطبقة المايلين المرفقة في وسط تدرج الكثافة المناسب. جهاز طرد مركزي لتكسير الأوعية والحصول على شريط من المايلين الغني بالدهون يطفو في الجزء العلوي من المادة الطافية. قم بإزالة شريط المايلين مع الوسائط المستهلكة وأعد تعليق الحبيبات في مخزن مؤقت جديد.

قم بتصفية مستحضر الوعاء الخام باستخدام مجموعة مرشح تحتوي على مرشح صغير بما يكفي بحيث لا تمر الأوعية من خلاله. انقل الفلتر إلى دورق جديد يحتوي على محلول عازل. اكشط ورق الترشيح برفق لفصل الأوعية وتخزينها لمزيد من التحليل.

استخدم مشرطا لشق الجلد من عنق الفأر إلى ال