موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 5:43 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ التثقيب الكهربائي عن طريق أخذ ماصة زجاجية تحتوي على محلول البلازميد المطلوب. قم بتثبيته بحامل ماصة دقيقة مزود بقطب كهربائي من الأسلاك الفضية، مما يضمن إدخال القطب الكهربائي في الماصة الدقيقة. خذ حجرة التثقيب الكهربائي التي تحتوي على قسم حصين رفيع للغاية مغمور في السائل الدماغي النخاعي الاصطناعي.
اغمس القطب الأرضي في السائل الموجود في الغرفة للتثقيب الكهربائي اللاحق. اخفض طرف الماصة في حجرة التثقيب الكهربائي وسجل مقاومة خط الأساس. استخدم مجهرا لوضع طرف الماصة بالقرب من الخلية المستهدفة. بمجرد ملامسة الماصة للغشاء العصبي ، تزداد مقاومتها بشكل حاد.
قم بتطبيق ضغط هواء إيجابي لإنشاء غزو صغير في الغشاء العصبي. قم بتطبيق شفط خفيف بسرعة لدفع الغشاء لأعلى ، مما يؤدي إلى إنشاء مانع تسرب فضفاض بين طرف الماصة والغشاء. كرر هذه العملية عدة مرات لتكييف الغشاء وتجنب تحلل الخلايا.
بعد التكييف ، قم بتطبيق شفط قوي لتشكيل ختم محكم بغشاء يسمى ختم gigaohm. استخدم النبضات الكهربائية لتشكيل مسام عابرة في المنطقة المغلقة من الغشاء. تسهل هذه الفتحات دخول البلازميدات داخل الخلايا العصبية المستهدفة. بعد التثقيب الكهربائي ، تعيد المسام الإغلاق ، وتحبس البلازميدات داخل الخلايا العصبية.
لتحضير مزارع الشرائح للتثقيب الكهربائي ، انقل إدخالات الثقافة ذات الأهمية إلى أطباق بتري فردية بطول 3 سم محملة ب 900 ميكرو
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية